NEFELOMETRI: NELERDEN OLUŞUR VE UYGULAMALARI - KIMYA - 2025

Nefelometre gelen ışımanın yönüne bir açı ile (çözelti ya da süspansiyon olarak) parçacıkların neden radyasyon ölçümü ve saçılan radyasyon gücünün ölçülmesini kapsar.

Asılı bir parçacığa bir ışık demeti çarptığında, ışığın bir kısmı yansıtılır, başka bir kısmı emilir, bir başkası saptırılır ve geri kalanı iletilir. Bu nedenle, ışık, içinde katı parçacıkların bir süspansiyonunun bulunduğu şeffaf bir ortama çarptığında, süspansiyon bulanık görünür.

Nefelometri nedir?

Radyasyonun çözelti içindeki parçacıklar tarafından dağılımı

Bir ışık ışınının asılı bir maddenin parçacıklarına çarptığı anda, ışının yayılma yönü yönünü değiştirir. Bu etki aşağıdakilere bağlıdır:

1. Parçacığın boyutları (boyut ve şekil).

2. Süspansiyonun özellikleri (konsantrasyon).

3. Işığın dalga boyu ve yoğunluğu.

4. Olay ışığı mesafesi.

5. Algılama açısı.

6. Ortamın kırılma indisi.

Nefelometre

Nefelometre, sıvı bir numunedeki veya bir gazdaki asılı parçacıkları ölçmek için kullanılan bir alettir. Böylece, bir ışık kaynağına 90 ° açıyla yerleştirilen bir fotosel, süspansiyonda bulunan parçacıklardan gelen radyasyonu algılar.

Aynı şekilde parçacıkların fotosele doğru yansıttıkları ışık da parçacıkların yoğunluğuna bağlıdır. Şema 1, bir nefelometreyi oluşturan temel bileşenleri göstermektedir:

Şekil 1. Bir nefelometrenin temel bileşenleri.

K.

Nefelometride yüksek ışık çıkışı olan bir radyasyon kaynağına sahip olmak hayati önem taşır. Ksenon lambalar ve cıva buharlı lambalar, tungsten halojen lambalar, lazer radyasyonu gibi farklı tipler vardır.

B.

Bu sistem, radyasyon kaynağı ile küvet arasına yerleştirilmiştir, böylelikle küvet üzerinde istenen radyasyona kıyasla farklı dalga boylarına sahip radyasyondan kaçınılmış olur.

Aksi takdirde, solüsyondaki flüoresans reaksiyonları veya ısıtma etkileri ölçüm sapmalarına neden olur.

C.

Genellikle prizmatik veya silindirik bir kaptır ve farklı boyutlarda olabilir. Bu, incelenen çözümdür.

D.

Detektör, belirli bir mesafede (genellikle küvete çok yakın) bulunur ve süspansiyondaki partiküller tarafından saçılan radyasyonu tespit etmekten sorumludur.

VE.

Genel olarak verileri alan, dönüştüren ve işleyen elektronik bir makinedir, bu durumda yapılan çalışmadan elde edilen ölçümlerdir.

Sapmalar

Her ölçüm, esas olarak aşağıdakiler tarafından verilen bir hata yüzdesine tabidir:

Kirlenmiş hücreler: Hücrelerde, incelenen solüsyonun dışındaki herhangi bir ajan, hücre içinde veya dışında, detektöre giden yayılan ışığı azaltır (kusurlu hücreler, hücre duvarlarına yapışan toz).

Girişimler : mikrobiyal bir kirletici maddenin veya bulanıklığın varlığı, yayılma enerjisini dağıtır ve dağılımın yoğunluğunu artırır.

Floresan bileşikler : Bunlar, olay radyasyonu tarafından uyarıldığında hatalı ve yüksek saçılma yoğunluğu okumalarına neden olan bileşiklerdir.

Reaktif Saklama : Yetersiz sistem sıcaklığı, olumsuz çalışma koşullarına neden olabilir ve bulanık veya çökelmiş reaktiflerin varlığına yol açabilir.

Elektrik gücündeki dalgalanmalar : Gelen radyasyonun bir hata kaynağı olmasını önlemek için, üniform radyasyon için voltaj dengeleyiciler önerilir.

Metrolojik özellikler

Tespit edilen radyasyonun ışıma gücü parçacıkların kütle konsantrasyonu ile doğru orantılı olduğundan, nefelometrik çalışmalar teorik olarak diğer benzer yöntemlere (türbidimetri gibi) göre daha yüksek bir metrolojik hassasiyete sahiptir.

Ayrıca bu teknik, seyreltik solüsyonlar gerektirir. Bu hem soğurma hem de yansıma olaylarının en aza indirilmesine izin verir.

Uygulamalar

Nefelometrik çalışmalar klinik laboratuvarlarda çok önemli bir yere sahiptir. Uygulamalar, immünoglobulinlerin ve akut faz proteinlerinin belirlenmesi, tamamlayıcı ve pıhtılaşmaya kadar uzanır.

Bağışıklık kompleksi tespiti

Biyolojik bir numune ilgi konusu bir antijen içerdiğinde, bir immün kompleksi oluşturmak için bir antikorla (bir tampon solüsyonunda) karıştırılır.

Nefelometri, antijen-antikor reaksiyonu (Ag-Ac) tarafından saçılan ışık miktarını ölçer ve bu şekilde immün kompleksler tespit edilir.

Bu çalışma iki yöntemle gerçekleştirilebilir:

Bitiş Noktası Nefelometrisi:

Bu teknik, üzerinde çalışılan biyolojik numunenin antikorunun yirmi dört saat inkübe edildiği uç nokta analizi için kullanılabilir.

Ag-Ac kompleksi, bir nefelometre kullanılarak ölçülür ve saçılan ışığın miktarı, kompleks oluşturulmadan önce gerçekleştirilen aynı ölçümle karşılaştırılır.

Kinetik nefelometri

Bu yöntemde, kompleks oluşum hızı sürekli olarak izlenir. Reaksiyon hızı, numunedeki antijen konsantrasyonuna bağlıdır. Burada ölçümler zamanın bir fonksiyonu olarak alınır, dolayısıyla ilk ölçüm "sıfır" (t = 0) zamanında alınır.

Kinetik nefelometri, çalışma son nokta yönteminin uzun süresine göre 1 saat içinde yapılabildiğinden en yaygın kullanılan tekniktir. Dağılım oranı, reaktif eklendikten hemen sonra ölçülür.

Bu nedenle, reaktif sabit olduğu sürece, mevcut antijen miktarı, değişim hızı ile doğru orantılı kabul edilir.

Diğer uygulamalar

Nefelometri genellikle suyun kimyasal kalitesinin analizinde, berraklığını belirlemek ve arıtma süreçlerini kontrol etmek için kullanılır.

Ayrıca, olay ışığında ürettikleri saçılmadan partikül konsantrasyonunun belirlendiği hava kirliliğini ölçmek için de kullanılır.

Referanslar

1. Britannica, E. (nd). Nefelometri ve türbidimetri. Britannica.com'dan kurtarıldı
2. Al-Saleh, M. (nd). Türbidimetri ve Nefelometri. Pdfs.semanticscholar.org adresinden erişildi.
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Technochemical.com'dan kurtarıldı
4. Morais, IV (2006). Türbidimetrik ve Nefelometrik Akış Analizi. Repository.ucp.p'den alındı
5. Sasson, S. (2014). Nefelometri ve türbidimetri prensipleri. Notesonimmunology.files.wordpress.com adresinden kurtarıldı
6. Stanley, J. (2002). İmmünoloji ve Serolojinin Temelleri. Albany, NY: Thompson Learning. Books.google.co.ve’den alındı
7. Vikipedi. (Sf). Nefelometri (tıp). En.wikipedia.org'dan kurtarıldı