SAFRANIN: ÖZELLIKLER, KULLANIM, TEKNIKLER, TOKSISITE - KIMYA - 2025

Safranin iki benzenoid halka ve 2 kinoid halkaların sahip kimyasal yapısı adlı bir meriquinoide boya olup, ikinci kırmızı renk sağlayan olanlar olmak.

Bilimsel adı 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenil-fenazinyumkloro dimetil safranin olduğundan ve kimyasal formülü C ₂₀ H ₁₉ N ₄ olduğundan, kısa biçiminde dimetil safranin veya bazik kırmızı 2 olarak da adlandırılır. Cl.

Safraninin kimyasal yapısı benzenoid ve kinoid halkaları gösterir / Sulu safranin çözeltisi. Kaynak: MSc tarafından düzenlenmiş NEUROtiker. Marielsa Gil / LHcheM

Trimetil-safranin adı verilen bir varyant var ancak iki madde arasında önemli bir fark yok.

Safranin, tek renkli bir boyadır ve kimyasal formülün özelliklerine bağlı olarak pozitif yüklü bir maddedir. Bu nedenle negatif yüklü yapılara yakınlığı vardır. Bu yapılar kırmızıya boyanacaktır.

Bu özellik, hem ökaryotik hem de prokaryotik organizmaların çeşitli hücresel yapılarını boyamak için birçok histolojik teknikte uygulanabilirlik sağlar.

Safranin, bakteriyolojide rutin kullanım için önemli ve iyi bilinen tekniklerde kontrast boya olarak kullanılmaktadır. Bu teknikler şunlardır: Gram-Hucker boyası, sporlar için Schaeffer Fulton boyası veya diğerleri arasında bakteri kapsüllerinin boyanması.

karakteristikleri

Safran rengi (Crocus sativus çiçeğinin stigmalarından elde edilen bir baharat) bu boyayı adlandırmak için ilham kaynağı oldu. Safran teriminden safranin adı gelir. Bunun nedeni safranın rengi ile bu boyanın sağladığı renklendirme arasındaki büyük benzerliktir.

Safranin, her iki sunum da suda çözünür olan kristaller veya toz halinde mevcuttur. Safranin boyası kokusuzdur. Yapıları kırmızı lekeler. Safranin boyasını çeken yapılara safranofiller denir.

Yapısal olarak safranin karmaşıktır, uçlarında iki benzenoid halkası vardır ve merkezde N ⁺ katyonunun bulunduğu iki kinoid halkası bulunur . Yapının merkezi, rengi sağlamaktan sorumlu sistemdir. Bu özelliğinden dolayı bu renklendirici kategori II'de sınıflandırılır.

Kullanım

Safranin, çeşitli yapıları boyamak için kullanılır. Özellikle gastrointestinal sistemde bulunan Kulchitsky hücrelerini vurgular, ayrıca enterokromaffin hücreleri olarak da adlandırılır.

Rickettsiaceae familyasına ait mikroorganizmaları boyayabilir. Benzer şekilde, Brucella cinsi bakterileri boyamak için modifiye edilmiş Koster yöntemi gibi çeşitli tekniklerde kullanılır.

Safranin ise Schaeffer Fulton spor boyama tekniğinde ve Gram-Hucker boyamasında kullanılmaktadır. Her iki teknikte de safranin kontrast boya görevi görür.

İlkinde, sporlar malakit yeşili rengini alır ve diğer yapılar safranin ile kırmızıdır. İkincisi, Gram negatif bakteriler renk değiştirme adımında mor kristalin rengini kaybeder, bu nedenle safranin Gram negatif bakterileri kırmızıya boyayan bakteridir.

Ek olarak safranin, 1: 5000 safranin seyreltmesi ile Brucella agar besiyerini hazırlamak için bakteriyolojide kullanılır. Bu ortam, Brucella suis türlerini türlerin geri kalanından ayırmaya yarar. Bu besiyerinde Brucella melitensis ve Brucella abortus büyür ancak B. suis inhibe edilir.

Tarımsal-endüstriyel alanda, safranin% 2.25 oranında kullanılmış ve şeker kamışı bitkisinden elde edilen sap örneklerini boyamak için 1:10 oranında seyreltilmiştir.

Bu bitki genellikle Leifsonia xyli subsp bakterisinden etkilenir. bitkinin ksilemine zarar veren xyli. Lekeli gövdeler, ksilem damarlarının işlevini belirlemek için değerlendirilir.

Bakteriyoloji alanındaki teknikler

R boyama için Castañeda boyası

Bir tampon solüsyonuna (fosfat tamponu pH 7.6) bir kan veya doku yayması yerleştirilir. Kendiliğinden kurumasını bekleyin ve ardından 3 dakika boyunca metilen mavisi ile kaplayın ve safranin ile zıt boyayın. Rickettsiae, kırmızı arka planla kontrast oluşturan mavi renktedir.

Koster boyası için değiştirildi

Çakmakta sabitleme için bir leke yapılır ve yakılır. Daha sonra 2 kısım doymuş sulu safranin ile 3 kısım 1 mol / L KOH solüsyonu karışımı ile 1 dakika boyunca kaplanır. Damıtılmış suyla bir yıkama yapılır ve% 1 karbolik metilen mavisi ile zıt boyanır.

Numune Brucella cinsi bakteriler içeriyorsa, bunlar mavi bir arka plan üzerinde turuncu görünecektir.

Bakteriyel kapsül boyama

Hindistan mürekkebi ile bakteriyel süspansiyon karışımı yapılır ve safranin eklenir. Mikroskop altında, her bakteri kapsülünün etrafında siyah bir arka planla kırmızımsı bir hale görünecektir.

Spor boyama

Bakteriyel süspansiyonla yayılır. Daha sonra ısıya sabitlenir. % 5 malakit yeşili ile kaplıdır, buhar çıkıncaya kadar sık ​​sık yanar. İşlem 6-10 dakika tekrarlanır. Son olarak su ile yıkanır ve% 0.5 safranin ile 30 saniye boyunca zıt boyanır. Basiller kırmızıya boyanır ve sporlar yeşile boyanır.

Gram-Hucker boyası

Bakteriyel süspansiyonla smear yapılır ve ısıya sabitlenir. Slaytı 1 dakika boyunca kristal menekşe ile örtün. Daha sonra lugol 1 dakika boyunca mordan çözelti olarak yerleştirilir. Daha sonra aseton alkol ile ağartılır ve son olarak 30 saniye boyunca safranin ile zıt boyanır.

Gram pozitif bakteriler mavimsi mor ve Gram negatif bakterileri kırmızı boyar.

Bazı laboratuvarlar, modifiye edilmiş Gram-Kopeloff tekniğini benimsemek için Gram-Hucker tekniğini kullanmayı bıraktı. İkincisi, safranin yerini temel fuksin ile değiştirir. Bunun nedeni, safraninin Legionella, Campylobacter ve Brucella cinslerinin türlerini zayıf bir şekilde boyamasıdır.

Histoloji alanındaki teknikler

Kulchitsky hücre boyama (enterokromafinler)

Gastrointestinal sistemden doku bölümleri gümüş klorür ile boyanır. Daha sonra sodyum tiyosülfat ile rengi giderilir ve son olarak safranin ile zıt boyanır.

Kulchitsky hücreleri, siyahımsı kahverengi granüllerin varlığı ile ayırt edilir.

Osteoartrit lekesi

Safranin pozitif yüke sahip olduğu için glikozaminoglikanların karboksil ve sülfat gruplarına çok iyi bağlanır. Bunlar, eklem kıkırdağını oluşturan proteoglikanların bir parçasıdır. Bu anlamda safranin O ile boyama yapılırken kıkırdak kaybı olup olmadığını tespit etmek mümkündür.

Kıkırdak dokusu kaybı, Mankin ölçeği kullanılarak ölçülebilir veya osteoartrit ölçeği olarak da adlandırılabilir.

Teknik aşağıda açıklanmıştır: histolojik bölüm Weigert'in demir hematoksilen solüsyonu içeren bir tepsiye daldırılır, daha sonra asit alkolden geçirilir ve su ile yıkanır.

Hızlı yeşile batırılarak renklendirme işlemine devam edilir, asetik asit ile yıkanır ve şimdi safranin O içine daldırılır. İşlemi bitirmek için artan sırayla farklı konsantrasyonlarda alkoller kullanılarak kurutulur. Son adım, numunenin berraklaşması için ksilen veya ksilen gerektirir.

Slaytlar, mikroskop altında gözlenmek üzere Kanada balsamı veya benzeri ile şartlandırılır.

Bu teknikle çekirdekler siyah, kemik yeşili ve proteoglikanların kırmızı bulunduğu kıkırdak boyanır.

Makroalglerin tanımlanması için leke

Pérez ve arkadaşları, 2003'te makroalgleri boyamak için basit ve ucuz bir teknik önerdiler. Örnekler, parafin histolojik kesitlerinde hazırlanır. Kesitler% 1 gliserin ile sabitlenir ve tamamen kurumaları sağlanır. Daha sonra parafini çıkarmak için ksilol içine yerleştirilir.

Bölüm, her birinde 2 dakika olmak üzere farklı konsantrasyon derecelerinde (azalan sırayla) etanol içeren bir dizi tepsiden geçirilerek rehidre edilir.

Daha sonra, her ikisi de% 50 etanol ile hazırlanan% 1 toluidin mavisi ile% 1 safranin karışımı ile 5 dakika boyanır. Karışıma, mordan görevi gören üç damla pikrik asit eklenir.

Daha sonra tekrar alkol tepsilerinden geçirilerek susuzlaştırılır ama bu sefer artan bir şekilde. Son olarak ksilol ile durulanır ve Kanada balzamı ile gözlemlenmek üzere numune hazırlanır.

Toksisite

Neyse ki safranin, onunla uğraşanlar için tehlike oluşturmayan bir boyadır. Zararsız bir renklendiricidir, kanserojen değildir ve yanıcı değildir.

Deri veya mukoza ile doğrudan temas, bölgede büyük komplikasyonlar olmaksızın hafif bir kızarıklığa neden olabilir. Bunun için etkilenen bölgenin bol su ile yıkanması tavsiye edilir.

Referanslar

1. Garcia H. Colorante safranina O. Sağlıkta teknisyen, 2012; 1 (2): 83-85. Medigraphic.com'da mevcuttur
2. Gil M. Gram boyası: fondöten, malzemeler, teknik ve kullanımlar. 2019. Şu adresten ulaşılabilir: lifeder.com
3. Gil M. Spor boyama: gerekçe, teknikler ve kullanımlar. 2019. Şu adresten ulaşılabilir: lifeder.com
4. Safranina. " Vikipedi, bedava ansiklopedi. 7 Mart 2017, 10:39 UTC. 3 Ağu 2019, 20:49 en.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Gracilariopsis tenuifrons ve Gracilaria chilensis (Rhodophyta) 'nın anatomik yorumunda yararlı boyama tekniği. Eylem Bot. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Şu adresten ulaşılabilir: scielo.org.
6. Aleika Kilisesi, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Ksilem damarlarının işlevselliği ile Leifsonia xyli subsp. xyli. Rev. Sebze Koruması. 2007; 22 (1): 65-65. Mevcut: scielo.sld