BAKTERIYOLOJIK DÖNGÜ: ÖZELLIKLERI, TÜRLERI, KULLANIMLARI - BIYOLOJI - 2025

Bakteriyolojik döngü mikrobiyel kültürlerin (bakteriler ve mantarlar) ve ekim için mikrobiyoloji tarafından kullanılan bir çalışma alettir. Belki de bu profesyoneller tarafından en çok kullanılan araçtır.

Kullanımı basit görünüyor, ancak gerçekte çok fazla eğitim gerektiriyor. Ekim işlemine başlamadan önce öze Bunsen brülöründe sterilize edilmeli, ardından sıvı bir kültürden veya katı bir kültürden gelebilecek mikrobiyal aşı alınır.

Bakteriyolojik döngü türleri. Kaynak: Makine tarafından okunabilen yazar sağlanmadı. ば や お varsayıldı (telif hakkı taleplerine göre).

Aşı alındıktan sonra, sıvı bir ortamda biriktirilebilir veya katı bir ortama ekilebilir. Her prosedürden sonra döngü tekrar sterilize edilir. Sap, slayt üzerinde mikrobiyal lekeler yapmak için de uygundur.

Bakteriyolojik halkanın platin halka veya halka, inokülasyon halkası veya tohum halkası dahil birçok adı vardır, ancak gerçek adı Kohle halkasıdır.

Sapın yapıldığı malzeme genellikle bir nikel-krom (nikrom) alaşımı veya platindir. Piyasada bulunan diğer bir çeşit, tek kullanımlık plastik bakteriyolojik halkalardır.

Öte yandan, her biri bir mikrobiyolog tarafından gerçekleştirilen görevler dahilinde bir işlevi yerine getiren birkaç tür bakteriyolojik döngü vardır. Sap seçimi, yapılması gerekenlere bağlı olacaktır.

Örneğin, bir mikroorganizmayı izole etmek için tükenerek bir striatum gerçekleştirmek için, kalibre edilip edilmediğine bakılmaksızın kapalı bir halka ile biten platin halka kullanılır.

Halbuki, CFU'ları ölçmenin önemli olduğu bir idrar örneği ekecekse, kalibre edilmiş özeyi kullanmak gerekir. Benzer şekilde, delinerek ekilmesi gereken biyokimyasal testleri aşılamak için iğne halkası gereklidir. Sapın eğitimli personel tarafından kullanılması önemlidir.

karakteristikleri

Bakteriyolojik döngüler iki uç noktadan oluşur. Bir uç tutamağa veya tabana karşılık gelirken, diğeri tutacağın kendisidir.

Taban veya tutamak

Taban, kullanım sırasında tutacağı kavramaya yarar. Genellikle metaliktir, ancak sapın ucu çakmak üzerinde sterilize edildiğinde operatörün yanmasını önlemek için bir ısı yalıtıcısına sahiptir. Daha uzun da olsa yaklaşık 20 cm ölçüsündedir. Kolu ayarlamak için bir dişi vardır.

Üstesinden gelmek

İşlevsel uç, yani mikroorganizmalar ve kültür ortamı ile temas eden kısımdır. Tabana yerleştirilmiş ince bir telden oluşur.

Sap, nikrom veya platinden yapılabilir, bu nedenle bazen platin tutacak olarak adlandırılır. Yaklaşık 6,5 cm uzunluğundadır ve yaklaşık 0,20 mm ölçüsü vardır. Saplı tutacak 26,5 cm ölçüsünde olabilir. Ölçümler üreticiden üreticiye değişebilir.

Türleri

Birkaç tür bakteriyolojik döngü vardır ve her birinin belirli bir kullanımı vardır. Kulp türleri şunlardır: kalibre edilmiş halka biçimli sap, kalibre edilmemiş halka biçimli sap, düz veya iğne sap, spatül sap, "L" şekilli sap ve keskin uçlu sap.

Öte yandan, saplar kalıcı veya tek kullanımlık olabilir. Kalıcı kullanım için olanlar çakmakta sterilize edilir, tekrar kullanılabilir ve çok dayanıklıdır. Tek kullanımlık ürünler fabrikadan steril iken, yalnızca bir kez kullanılır ve atılır.

Uygulamalar

Halka tutacak, kalibre edilmemiş

Mikrobiyoloji laboratuvarında en çok kullanılan saptır. Bir mikrobiyal süspansiyondan (sıvı besiyeri) veya koloninin bir kısmından (katı ortam), başka bir kültür ortamına ekilmek üzere bir biyokimyasal test veya duruma göre daha zenginleştirilmiş veya seçici bir ortamdan bir aşı almak için kullanılır. Ayrıca slayt üzerinde mikrobiyal smear yapmak için de kullanışlıdır.

Bu tür bir döngü ile ilk inokülum eklenebilir. Aynı zamanda agar üzerinde zarar vermeden sorunsuz bir şekilde kayması için tasarlanmıştır. Tabii ki, bu, iyi bir çizgi oluşturmak için doğru kuvveti ve hareketleri uygulayarak tohumlama tekniğini kullanacak eğitimli bir personel gerektirir.

Bu sap ile çeşitli tohumlama teknikleri gerçekleştirilebilir. Örneğin, Petri kaplarındaki katı ortam genellikle tükenme ile tohumlanır (birkaç teknik vardır, video 1'e bakın).

Bu teknik, özellikle örnek polimikrobiyal olduğunda, yani kültür saf olmadığında (birden fazla mikroorganizma türü içeriyorsa), bunları incelemek ve tanımlamak için izole edilmiş koloniler elde etmeyi amaçlamaktadır.

Bunun yerine takozlar, bakteri kütlesi elde etmek için basit bir zikzak içine yerleştirilir, bu durumda kolonileri izole etmek için gerekli değildir.

Bazen belirli örnekler almak için de kullanılırlar. Örneğin, Rojas ve arkadaşları bakteriyolojik döngüyü sıçanlardan kazınmış vajinal doku örnekleri toplamak için kullandılar.

Halka uçlu bakteriyolojik halka, kalibre edilmemiş. Kaynak: Pixinio.com

Halka şeklindeki tutamak, kalibre edilmiş

Bu sap, adından da anlaşılacağı gibi, belirli bir miktarda mikrobiyal süspansiyon alacak şekilde kalibre edilmiştir. İnokülumun teknikte standartlaştırılana uyması gerektiğinde kullanılır.

Örneğin idrar kültürü ekimi için çok yaygındır. Bu durumda 0,01 ml ve 0,001 ml kalibre edilmiş öze kullanılabilir.

Kalibre edilmiş kulpların, numunenin alındığı açıya ve kabın ağzının boyutuna göre değişen bir hata payına sahip olduğuna dikkat edilmelidir.

0,001 ml öze, küçük ağızlı (≤ 7 mm) bir kaba dikey olarak yerleştirilirse, alınan miktar istenenden% 50 daha az olacaktır.

Bunun nedeni, kabın ağzının çapı ne kadar küçükse, yüzey gerilimi o kadar yüksek ve dolayısıyla aralarındaki (cam - sıvı) yapışma kuvvetleri de artmaktadır. Bu, sap tarafından alınan sıvı yükünün daha az olmasına neden olur.

Oysa geniş ağızlı (≥ 22 mm) bir kapta 45 ° 'lik açıyla alınırsa gerekli miktarın% 150 fazlası toplanabilir. Bu durumda yüzey gerilimi daha düşüktür ve cam / plastik kohezyon kuvvetleri azalırken sıvı-sıvı kohezyon kuvveti artar.

Yukarıdakilerden dolayı, koloni oluşturan birimlerin miktarının belirlenmesi için diğer yöntemler bazen idrar kültürleri için tercih edilir.

Düz veya iğne sap

Aynı zamanda iplik tutamacı olarak da adlandırılır. Bazı biyokimyasal testleri, özellikle de delme tekniği ile tohumlanması gerekenleri aşılamak için kullanılır. Örnek, bir blok şeklinde hazırlanan yarı katı ortam, örneğin: SIM, MIO ve O / F ortamı.

Ek olarak, motiliteyi değerlendiren MIO ve SIM durumunda, pozitif bir hareketliliğin yorumlanması bakteriler ilk inokülumun yanlarına doğru büyüdüğünde meydana geldiğinden, delme işleminin bir iğne ilmeği ile yapılması önemlidir.

Döngü döngüsü ile inoküle edilen bir test, sonuçları tahrif edebilir (yanlış pozitif). Bu sebeple bu tip ekimde deliğin kendine özgü olmasına, çıkarıldığında girdiği yönde çıkmasına dikkat edilmelidir.

Kama şeklinde hazırlanmasına rağmen iğne ile ekilmesi gereken bir diğer test ise Kligler'dir. Bu testte, belirli kimyasal reaksiyonların meydana gelmesi için oksijenden fakir bir ortam gerektiğinden oksijenin agara derinlemesine nüfuz etmesi önerilmez. Bu tutamaç aynı zamanda alt kültürleme amacıyla belirli bir koloniye dokunmak için de kullanılır.

Spatula tutacağı

Çoğu mikroorganizma yumuşak, kolay saçılan koloniler verir. Bununla birlikte, kolonileri sert ve kuru olan bazı mikrobiyal ajanlar vardır, örneğin genel olarak mikobakteriler ve bazı mantarlar. Bu durumlarda, spatül tutamacının kullanılması yararlıdır.

"L" şekilli sap

En sık kullanımı mantar kültürlerini, özellikle küfleri çınlamaktır.

Keskin uçlu tutamak

Polimikrobiyal kültürlerde bulunan çok küçük kolonileri, alt kültür yapabilmek için almak için kullanışlıdır.

Ekim teknikleri

Video 1

Platin sapın sterilizasyonu

Kulp, kullanımdan önce ve sonra sterilize edilmelidir. Bakteriyolojik halkayı çakmakta sterilize etmek için şu şekilde hareket edin: sap, alevin tepesine, uçtan yukarıya sterilize edilecek şekilde mümkün olduğu kadar dikey bir pozisyonda yerleştirilmelidir.

İnce filament parlak kırmızıya döndüğünde steril olduğu söylenebilir. Kullanmak için soğutulur ve seçilen numune alınır. (2. videoya bakın).

Bakteriyolojik döngünün sterilizasyonu

Video 2

Referanslar

1. "Bakteriyolojik döngü" Wikipedia, Özgür Ansiklopedi. 23 Temmuz 2019 13:31 UTC. 18 Ağu 2019, 22:45. Vikipedi.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Mikrobiyologlar için kalibre edilmiş metal tutacaklar: Ulusal üretimin bir alternatifi. Soc. Gel. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Ve.scielo.org adresinde mevcuttur
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik Tanı. 5. baskı. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, vd. Sıçanlarda akut ağrı modelinde Eupatorium arsenei çiçeklerinden heksan ekstresinin analjezik etkisinin belirlenmesi. mex. Bilim. Çiftlik. 2015; 46 (1): 64-69. Mevcut: scielo.org