- temel
- karakteristikleri
- Kompozisyon
- kullanım
- süreç
- Kültürlerin mantar yapılarının boyanması
- Doğrudan biyolojik örnek boyama
- Tanımlanmasında mikrop tüpü boyama
- Laktofenol Güvenlik Veri Sayfası
- Sağlık
- çabuk parlama
- kararsızlık
- Özel tehlikeler
- Referanslar
Laktofenol mavisi ya da mavi pamuklu tek boya özellikleri ile hazırlanır. Klinik laboratuvarlarda ağırlıklı olarak hif, germ tüpleri ve sporlar gibi mantar yapılarını renklendirmek için kullanılır.
Bazı mantarların olası veya ön teşhisine yardımcı olur, ancak her zaman biyokimyasal veya serolojik testler gibi daha spesifik testlerle teşhisi pekiştirmek tavsiye edilir.
Laktofenol mavisi lekesinin grafik temsili, laktofenol mavisi ile lekelenmiş smear, mikroskoba monte preparat. Kaynak: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8
Laktofenol mavisi, laktik asit, anilin mavisi, gliserin, fenol ve deiyonize sudan oluşur. Laboratuvarda hazırlanabilir veya kullanıma hazır olarak satın alınabilir. Hazırlandıktan sonra kullanıma hazırdır, hiçbir koşulda seyreltilmemelidir, çünkü bu işlem korkunç sonuçlar verecektir.
Bileşenlerinin konsantrasyonu onu mantar yapılarını boyamak için ideal kılar, çünkü fenol eşlik eden bakteriyel mikrobiyotayı ortadan kaldırırken, laktik asit mantar yapısı etrafında koruyucu bir film oluşturur. Son olarak, anilin mavisi, mantarın yapılarına tutunma eğilimine sahiptir.
temel
Laktofenol mavisi ile belirli bir mikolojik kültürün mantar yapılarının basit bir şekilde boyanması gerçekleştirilir. Basit olarak adlandırılır çünkü yalnızca bir renklendirici kullanır.
Laktofenol mavisi, lekelenmenin yanı sıra, laktik asit ve fenolün ortak etkisi sayesinde numunenin arıtıcısı olarak da görev yapar, ayrıca fenol bir mordan gibi davranır ve aynı zamanda mikroorganizmanın parçalanmasını engelleyen hidrolitik enzimleri inhibe eder. Mevcut olabilir.
Laktik asit, mantarın yapılarının morfolojisini korurken.
Öte yandan, anilin mavisi, kitin içeren yapılara yapışma veya bağlanma özelliğine sahiptir. Yapılar açık maviye boyanmış.
Mantar mikroorganizmalarının, özellikle küflerin hücre duvarının kitin içerdiğine dikkat edilmelidir, bu nedenle bu boya, bu mikroorganizmaları boyamak için idealdir.
karakteristikleri
Laktofenol mavisi çözeltisi, kuvvetli asidik, hafif bulanık, açık mavi renkli sulu bir boyadır. 15 ° C ile 25 ° C arasında saklanırsa stabil kalır. Şişe düzgün bir şekilde kapalı tutulmalıdır. Cilt ve mukoza zarları için tahriş edici ve aşındırıcıdır.
Kompozisyon
Bir litre laktofenol mavisi hazırlamanın formülü aşağıdaki gibidir:
-250 g / L laktik asit
-1.0 g / L anilin mavisi veya metil mavisi
-500 g / L gliserin
-250 g / L fenol
-250 ml deiyonize veya distile su.
Fenol, önceden ısıtılmış suda çözülür. Laktik asit ve gliserin eklenir ve çok iyi karıştırılır. Sonunda, anilin mavisi çözülür. Tekrar karışır ve kullanıma hazırdır.
80 ml laktofenol mavisi solüsyonu hazırlamak için porsiyonlar şunlardır:
-20 g fenol kristalleri
-20 ml laktik asit
-40 ml gliserin veya gliserol
-20 ml damıtılmış su.
kullanım
Mantar yapılarını boyamak ve mikroskobik düzeyde gözlemlenen morfolojik özellikler aracılığıyla mantarın varsayımsal bir teşhisini yapabilmek için kullanılır.
süreç
Kültürlerin mantar yapılarının boyanması
- Yapıları gözlemlenecek mantarın saf bir kültürünü alın.
- Biyogüvenlik standartlarına uymak gerektiğinden, çoğu küfün çevreye yayılması kolay olduğundan ve bu nedenle bir tehlike oluşturduğundan, tercihen bir maske ve eldiven kullanarak laminer akışlı bir başlıkta veya çakmağın altında çalışın. operatör için.
- Slayta bir damla laktofenol mavisi yerleştirilir.
- Küçük bir kare yüksek kaliteli yapışkan bant kesin ve soğuk sterilize edilmiş platin sapın ucuna çok dikkatli bir şekilde yapıştırın.
- Platin tutacak, mantar kolonisinin en yüzeysel kısmına yaklaştırılır ve kültür, yapışkan bandın tam olarak bulunduğu yere çok dikkatli bir şekilde dokunulur.
- Daha sonra slayta alınır ve laktofenol mavisi damlasının üzerine yerleştirilir, bandın mükemmel şekilde uzatılmasına ve boya ile yağlanmasına dikkat edilir. Platin tutamak çok hassas bir şekilde çıkarılmıştır.
- Kasete bir damla laktofenol mavisi ve üstüne bir lamel damlatılır. Son derece kırılgan oldukları için mantar yapılarını tahrip etmemek için çok fazla baskı uygulamayın. Renklendiricinin yaklaşık 3 ila 4 dakika etki etmesine izin verilmelidir.
- Bu sürenin sonunda preparat mikroskop altında 10X veya 40X büyütmede izlenmeye hazırdır. 100X gözlem gerekiyorsa, daldırma yağı kullanılmalıdır.
- Mantarın bu türdeki karakteristik kahverengi rengini koruyacak olan dematiaceous mantarlar dışında, genel olarak mantarın yapıları maviye boyanmıştır.
Doğrudan biyolojik örnek boyama
Diğerlerinin yanı sıra balgam, irin, eksüdalar, sekresyonlar gibi doğrudan biyolojik bir numuneyi incelemek gerekirse, bunların numunenin dekontaminasyonu için önceden bir prosedüre sahip olması gerekir. Bunun için NaOH çözeltisi kullanılır.
Saç numuneleri olması durumunda bunlar doğrudan boyanabilir.
Muhtemel tinea capitis lezyonlarından (alopecik alanlar) etkilenen birkaç kıl (toplamda 10) alınır ve bir slayt üzerine yerleştirilir (slayt başına 3 ila 4 kıl). Üstüne birkaç damla laktofenol mavisi yerleştirilir ve hemen bir lamel ile kapatılır.
Slaytı forseps ile kavrayın ve bir brülör üzerinde hafifçe ısıtın. Bunu yapmak için alevden 3 ila 4 hızlı geçiş yapın. Mikroskobu 40X'te gözlemleyin ve saçın içindeki veya dışındaki sporları arayın (sırasıyla ektotriks veya endotriks). Gerekirse daldırma yağı ekleyin ve 100X'te gözlemleyin.
Tanımlanmasında mikrop tüpü boyama
Muhtemel Candida albicans kültürü 37 ° C'de 2 ila 4 saat insan serumunda inkübe edildikten sonra çözeltinin bir kısmı alınır ve laktofenol mavisi ile boyanır. Hazırlık mikroskop altında 40X'de gözlenir. Mikrop tüpü mevcuttur ve blastosporlar parlak mavi boyar.
Laktofenol Güvenlik Veri Sayfası
Ulusal Yangından Korunma Derneği (NFPA), çeşitli yönlere göre temsil ettiği risk açısından kimyasal maddeler için güvenlik bilgi formunu oluşturur, bunlar renkli bir eşkenar dörtgen ve 0- arasında değişen bir sayı ile sembolize edilir. Dört.
Sağlıkla ilgili tehlikeler mavi, yanıcılık kırmızıyla, kararsızlık veya reaktivite sarı renkte ve herhangi bir özel tehlike beyaz renkte belirtilmiştir.
Sağlık
NFPA'ya göre laktofenol mavisinin oluşturduğu sağlık riski seviye 3'tür. Bu, maddenin yutulduğunda veya deri veya mukoza ile doğrudan temas halinde son derece tehlikeli olduğu anlamına gelir.
Oldukça aşındırıcı ve tahriş edici bir maddedir.
Deri ve mukoza zarlarıyla temas ettiğinde ciddi yanıklara neden olur.
Yutulursa baş ağrısı, kafa karışıklığı, uyuşukluk, bilinç kaybı, solunum durması ve hatta ölüme neden olabilir.
çabuk parlama
NFPA'ya göre, Lactophenol Blue yanıcılık için Seviye 1 olarak derecelendirilmiştir. Bu, yalnızca 94 ° C'nin üzerinde ısıtıldığında yandığı anlamına gelir.
kararsızlık
Reaktivite açısından 0 (sıfır) düzeyinde NFPA'ya göre listelenmiştir. Bu, reaktivite riski olmadığı, yani kimyasal olarak kararlı bir madde olduğu anlamına gelir.
Özel tehlikeler
Hiçbir ek özel tehlike sunmaz.
Referanslar
- SAR Laboratuvarı. Laktofenol Mavisi. 2010. Labsar.com'da bulunabilir.
- Uygulamalı klinik kimya laboratuvarı. Laktofenol mavisi. 2015. Şu adresten ulaşılabilir: cromakit.es
- Merck Laboratuvarları. Çözelti içinde laktofenol mavisi mikroskobu. 2017. Bulunduğu yer: Kullanıcılar / Equipo / İndirmeler
- Acil Durum Kartı. Mantar boyama için laktofenol mavisi solüsyonu. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Kolombiya. 2014. javeriana.edu.co adresinden ulaşılabilir
- González M, Diamont D, Gutiérrez B. Kirletici olmayan bir alternatif olarak mantar yapılarını bitkisel boyalarla boyama tekniği. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Mevcut: Redalyc.
- Laboratuvar Himedia. Laktofenol Pamuk Mavisi. 2017. himedialabs.com adresinden temin edilebilir.
- Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Mikrobiyal Tanımlama için Biyokimyasal Testler ve Boyama Teknikleri. Science Direct, 2017; 61-73. Elsevier'den alınabilir