TRIPTIKAZIN SOYA SUYU: FONDÖTEN, HAZIRLAMA VE KULLANIMLARI - BIYOLOJI - 2025

Soya suyu tripton , seçici olmayan sıvı bir kültür ortamı, yüksek besin değerine vardır. Çok yönlülüğü nedeniyle mikrobiyoloji laboratuvarında en yaygın kullanılan sıvı kültür ortamlarından biridir.

Aynı zamanda, kısaltması İngilizce Tryptic Soy Broth için TSB veya İspanyolca kısaltması için CST olan triptik soya suyu veya sindirilmiş kazein-soya adıyla da bilinir. Bileşiminden dolayı kullanımları çok çeşitlidir. Triptein, soya peptonu, sodyum klorür, dipotasyum fosfat ve glikozdan oluşur.

Pigment üretiminin gözlendiği bir Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 suşu ile tohumlanan triptikazin soya suyu. Kaynak: Fotoğraf, yazar MSc tarafından çekilmiştir. Marielsa Gil.

Beslenme açısından zorlayıcı olanlar ve anaerobik bakteriler dahil olmak üzere klinik olarak önemli patojenik bakterileri çoğaltabilir. Bu ortamda bazı fırsatçı ve kirletici mantarlar da gelişebilir.

Yüksek besin gücü nedeniyle mikrobiyal kontaminasyonu tespit etme hassasiyeti yüksektir, bu nedenle aşıların mikrobiyolojik analizi için USDA Hayvan ve Bitki Sağlığı Kontrol Servisi tarafından tercih edilmiştir.

Benzer şekilde, triptikazin soya suyu, kozmetikler ve gıda gibi endüstriyel seviyedeki ürünlerin mikrobiyolojik çalışmaları için farklı farmakopelerin (Avrupa EP, Japon JP ve Kuzey Amerika USP) gereksinimlerini karşılar.

Öte yandan, büyük yararına rağmen, bu ortamın nispeten ucuz olduğunu ve çoğu mikrobiyoloji laboratuvarı için uygun maliyetli olduğunu belirtmekte fayda var. Hazırlaması da çok kolaydır.

temel

Triptein, pepton ve glikoz, onu hızlı mikrobiyal büyüme için ideal bir ortam haline getirmek için gerekli besin özelliklerini sağlar.

Yaklaşık 6 ila 8 saatlik inkübasyonda, çoğalma çoğu mikroorganizmada görülebilir. Bununla birlikte, büyümesi günler sürebilen yavaş büyüyen türler vardır.

Sodyum klorür ve dipotasyum fosfat sırasıyla ozmotik denge ve pH düzenleyici görevi görür. Büyümenin varlığı, ortamdaki bulanıklığın ortaya çıkmasıyla kanıtlanır; üreme yoksa besiyeri yarı saydam kalır.

Açık rengi sayesinde, Pseudomonas aeruginosa'nın ürettiği pigmente karşılık gelen, makalenin başındaki resimde gösterilen gibi pigmentlerin üretimini gözlemlemek mümkündür.

Hazırlık

-Triptysein soya suyu

Triptik soya çorbası hazırlamak için, 30 g kurutulmuş ticari ortam dijital bir ölçekte tartılmalıdır. Daha sonra bir şişede bulunan bir litre damıtılmış suda çözülür.

Karışım 5 dakika dinlenmeye bırakılır ve daha sonra ortamın çözünmesine yardımcı olmak için bir ısı kaynağına alınır. 1 dakika kaynatılırken sık sık karıştırılmalıdır.

Çözündükten sonra gerektiğinde uygun boyutta tüplere dağıtılır. Pamuk tapalı veya Bakalit kapaklı tüpler kullanılabilir. Daha sonra tüpler otoklavda 121 ° C'de 15 dakika sterilize edilir.

Ortamın pH'ı 7,3 ​​± 0,2'de kalmalıdır

Susuz kültür ortamının renginin açık bej olduğu ve kuru bir yerde 10 ila 35 ° C arasında saklanması gerektiği unutulmamalıdır. Hazırlanan et suyu açık kehribar rengindedir ve buzdolabında (2 ila 8 ° C) saklanmalıdır.

- Triptikazin soya suyu çeşitleri

Modifiye edilmiş triptikazin soya suyu, E. coli izolasyonu için seçici hale getirmek üzere safra tuzları ve novobiyosin eklenerek hazırlanabilir. Aynı amaca yönelik başka bir seçenek, vankomisin, sefiksim ve tellürit (2.5 ug / ml) ile takviye edilmiş triptikaz soya çorbası hazırlamaktır.

Diğer yandan, amaç biyofilm oluşumunu uyarmak olduğunda triptik soya suyuna daha fazla glikoz (% 0.25) eklenebilir.

kullanım

Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp ve Brucella sp gibi güç üreyen veya güç üreyen bakterilerin kan veya serum ile takviye edilmesine gerek kalmadan büyümesine izin verecek kadar besleyicidir.

Benzer şekilde, bu et suyunda Candida albicans Kompleksi, Aspergillus sp ve Histoplasma capsulatum gibi bazı mantarlar gelişebilir.

Ayrıca, anaerobik koşullar altındaki bu besiyeri, Clostridium cinsine ait bakterilerin yanı sıra, klinik öneme sahip sporlanmamış anaerobik bakterilerin geri kazanılması için idealdir.

% 6,5 sodyum klorür eklenirse, Enterococcus ve diğer Grup D Streptococcus'un büyümesi için kullanılabilir.

Araştırma düzeyinde, çeşitli protokollerde, özellikle biyofilm veya biyofilm oluşturan bakteri çalışmasında çok faydalı olmuştur. Ayrıca antibiyogramın Kirby ve Bauer yöntemi ile yapılması için gerekli olan% 0.5'lik Mac Farland bakteri süspansiyonunu hazırlamak için kullanılır.

Bu durumda, benzer görünüme sahip 3 ila 5 koloni alınır ve 4-5 ml triptikazin soya suyu içinde emülsiyon haline getirilir. Daha sonra 2 ila 6 saat 35-37 ° C'de inkübe edilir ve ardından steril salin kullanılarak istenen konsantrasyona ayarlanır. Triptikazin soya sıvıları 18 ila 24 saat inkübasyondan sonra kullanılmamalıdır.

ekilen

Numune doğrudan tohumlanabilir veya seçici ortamdan alınan saf koloniler alt kültürlenebilir. İnokülum, inkübasyondan önce besiyerini bulandırmamak için küçük olmalıdır.

Normalde aerobiyozda 37 ° C'de 24 saat inkübe edilir, ancak bu koşullar aranan mikroorganizmaya bağlı olarak değişebilir. Ayrıca gerekli olması halinde 37 ° C'de anaerobik koşullarda birkaç gün inkübe edilebilir. Örneğin, hızlı büyüyen veya güç üreyen mikroorganizmalar 7 güne kadar inkübe edilebilir.

Aşılar gibi farmasötik maddelerin mikrobiyolojik analizinde protokoller daha katıdır. Bu durumlarda, üremeyen et suyu 14 günlük sürekli inkübasyona ulaşana kadar atılmaz.

QA

Hazırlanan her partiden 1 veya 2 inoküle edilmemiş tüp, sterilliğini göstermek için inkübe edilmelidir. Değişmeden kalması gerekir.

Davranışlarını değerlendirmek için bilinen türler de ekilebilir. Kullanılabilecek suşlar arasında:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 veya 25923, Escherichia coli ATCC 8739, Streptococcus pyogenonia ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC30e5e Pneumoniae ATCC305e

Her durumda, gelişim her mikroorganizma için uygun atmosfer ve sıcaklık koşullarında tatmin edici olmalıdır.

Sınırlamalar

-Glukoz fermantasyonu, asit üretimi ile ortamın pH'ının düşmesine neden olur. Bu, asitliğe duyarlı bazı mikroorganizmaların hayatta kalması için sakıncalı olabilir.

-Asititeye ek olarak bakteriler birkaç gün sonra besinleri tükettiğinden, çevreyi rahatsız edici hale getiren toksik maddelerin birikmesi nedeniyle suşların bakımı için tavsiye edilmez.

- Et suyu kolayca kontamine olduğu için tüm sterilite protokollerine dikkat ederek çalışmalısınız.

- Triptikazin soya sıvılarını hazırladıktan sonra, suyu başka bir steril tüpe aktarmaya çalışmamalısınız, çünkü bu tip manevra kontaminasyona karşı çok hassastır.

Referanslar

1. Cona E. Agar difüzyon testi ile iyi bir duyarlılık çalışması için koşullar. Rev. chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Mevcut: scielo.org
2. Britannia Laboratuvarı. Triptein soya suyu. 2015. britanialab.com'da bulunabilir
3. MCD Laboratuvarı. Triptikazin Soya Suyu. Elektronik-systems.com adresinde mevcuttur
4. Neogen Laboratuvarı. Üç Parçalı Soya Suyu. Bulunduğu yer: foodafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, Medina L. Süt kremlerinde Escherichia coli O157: H7'nin geri kazanılması için manyetik immünoseparasyon tekniğinin değerlendirilmesi. ALAN. 2006; 56 (3): 257-264. Scielo.org.ve adresinde mevcuttur
7. Gil M, Merchán K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol M.Antimikrobiyal duyarlılık ve klinik kökene göre Staphylococcus aureus izolatlarında biyofilm oluşumu. Vitae. 2015; 62 (1): 1-8. Mevcut: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. Escherichia coli'nin İzolasyonu O157: Venezuela, Zulia Eyaleti, Miranda Belediyesi'nden Çift Amaçlı Sığır Dışkı Örneklerinde H7. Rev. Cient. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239-245. Mevcut: scielo.org