ÇAPRAZ TESTLER: BUNLAR NE IÇINDIR, TEKNIK, MANTIK, AŞAMALAR - İLAÇ

Crossmatch laboratuar çalışmaları sayıda vericiden (esas olarak tam kan ve paketlenmiş küresel) kan ürünleri alıcının kanı ile uyumlu olup olmadığını belirlemek için yapılır bulunmaktadır.

ABO uyumluluğu ve Rh faktörü için ek bir tamamlayıcı testtir. Çapraz eşleşmenin nedeni, bazen iki kişinin (verici-alıcı) aynı ABO ve Rh grubuna sahip olabileceği ancak yine de kanlarının uyumsuz olmasıdır.

Kaynak: unsplash.com

Bu tür uyumsuzluk, küçük antijenler olarak bilinen bir dizi kırmızı kan hücresi proteinine karşı antikorların varlığından kaynaklanmaktadır. Bu antijenler, kan grubu (ABO) ve Rh faktörü için olduğu için rutin olarak test edilmez.

Bunun nedeni, küçük antijenlerin çok daha az sıklıkta olması ve her bireyde değişken bir ifadeye sahip olmasıdır, bu nedenle onları grup ve Rh faktörü ile yapıldığı gibi kategorilere ayırmak neredeyse imkansızdır.

Bunun yerine donör kırmızı hücreler, antijen-antikor reaksiyonlarının varlığını tespit etmek için hasta serumu (majör eşleşme testi) ve donör serumu (minör eşleşme testi) ile hasta kırmızı hücreleri ile karıştırılır.

Hastanın veya donör serumunda küçük antijenlere karşı antikorlar olduğunda, testin pozitif olduğu söylenir, bu nedenle çoğu durumda belirli bir kan birimi transfüze edilemez.

ABO Grubu

Çapraz reaksiyonların ne hakkında olduğunu tam olarak anlamak için önce kan gruplarının temellerini bilmeniz gerekir.

Bu anlamda en önemli şey, kanın A, B, AB ve O olmak üzere dört gruba ayrılabileceğini bilmektir.

Bu grupların her biri, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde, farklı bir grubun potansiyel bir reseptörünün antikorları tarafından yabancı bir element olarak tanımlanan belirli bir proteini (antijen) ifade eder.

Kan eşleşmesinde antijen-antikor reaksiyonlarıyla ilgili en çarpıcı şey, antikorların var olması için önceden antijene maruz kalmanın gerekmemesidir. Bu, doğal antikorlar olarak bilinir.

Doğal antikorlar

Genel olarak, bir bireyin vücudunda antikorların var olması için, bireyin beyaz kan hücrelerinin daha önce antijene maruz kalmış olması gerekir.

Bu, yabancı antijen ile organizma arasındaki ilk temasta, ilk temastan sonra daha sonra üretildikleri için antikorların olmadığı anlamına gelir. Bu nedenle, bağışıklık sisteminin örneğin belirli bir virüse karşı antikorlara sahip olması, geçmişte bu virüse maruz kalmamışsa imkansızdır.

Yukarıdakilerin tek istisnası anti-AB antijenleridir. Bu durumlarda kişi, başka bir kişinin kırmızı kan hücreleriyle hiç temas halinde olmamasına rağmen, alyuvarlarının sahip olmadığı antijene karşı antikorlara sahiptir. Bu, doğal antikorlar olarak bilinir.

Kan grubu ile ilgili antijenler ve antikorlar

Kan grupları, ABO sistemi durumunda, kırmızı kan hücresi zarında spesifik antijenlerin (A veya B) ve tersine, eritrosit zarında bulunmayan antijene karşı antikorların varlığıyla belirlenir.

Bu nedenle, kan grubu A olan bir kişi, serumda anti-B antikorları varken, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde antijen A'yı ifade eder.

Aksine, B grubu hastalarda antikorlar anti-A iken B antijeni bulunur.

Bununla birlikte, AB kanı olan hastalarda hem A hem de B antijenleri vardır ve bu nedenle, o kişinin kırmızı kan hücrelerini yok edeceği için antikor yoktur.

Serumda anti-A ve anti-B antikorları varken, eritrosit membranının iki antijenden herhangi birini (ne A ne de B) sunmadığı O grubunda tam tersi meydana gelir.

ABO grubu uyumsuzluğu

Yukarıdakilerden ABO kan gruplarının uyumluluğu, eritrosit membranının antijeninin otomatik olarak serumdaki antikorları bildiğinden çıkarılabilir. Böylece:

- Kan A, grup A ve grup O ile uyumludur.

- Kan grubu B, kan B ve O ile uyumludur.

- O grubundaki insanlar (anti-A ve anti-B antikorlarına sahip oldukları için) sadece O kanı alabilirler, ancak kanları antijen içermediği için diğer tüm gruplar tarafından sorunsuz alınır.

- En sonunda. AB kan grubuna sahip olanlar, antijenlerin hiçbirine karşı antikorları olmadığı için diğer tüm gruplardan (A, B, O ve tabii ki AB) kan alabilir. Bununla birlikte, diğer tüm grupların bu kırmızı kan hücrelerini yok edecek antikorlara sahip olması nedeniyle, yalnızca AB grubundaki kişiler AB kanı alabilir.

Küçük antijenler

ABO gruplarında olduğu gibi, eritrositlerin yüzeyinde ABO grubu antijenleriyle aynı şekilde antijen olarak işlev gören bir dizi protein bulunabilir.

Bununla birlikte, bu antijenler tüm bireylerde mevcut değildir. Kombinasyonları heterojendir ve penetrans (protein ekspresyon seviyesi) değişkendir, bu nedenle ABO ve Rh için var olan gibi gruplara sınıflandırma yapılması imkansızdır. Bu, adını "düşük insidans antijenler" olarak da bilinen "küçük antijenler" den aldığı yerdir.

Sık olmamakla birlikte, küçük antijenlere karşı doğal antikorlar olabilir. Bunların arasında en yaygın olanları Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb ve Kidd'dir. Hepsi çok ciddi hemolitik ve transfüzyon sonrası reaksiyonlardan sorumludur.

Ek olarak, daha önceki transfüzyonlara bağlı olarak adı geçen antijenik proteinlerle veya çapraz bağışıklık nedeniyle, daha önceki temas yoluyla küçük antijenlere karşı duyarlılaşma durumu olabilir.

Çapraz bağışıklık

İki farklı kaynaktan (örneğin bir kırmızı kan hücresi ve bir bakteri) iki antijen çok benzer olduğunda, bu antijenik proteinlerden birine karşı antikorların da neredeyse aynı oldukları için diğeri ile reaksiyona girdiği noktaya kadar çapraz bağışıklık olduğu söylenir. .

Bunu daha iyi anlamak için önceki varsayımsal örneği ele alalım (kırmızı kan hücresinden ve bir bakteriden antijenler). Her iki durumda da doğal antikorlar yoktur, ancak bir kişi bakteriye maruz kalırsa, ona karşı antikorlar üretecektir.

Bu tür antikorlar daha sonra, antijenleri, antikorların oluşmasına neden olan bakterilerin antijenlerine çok benziyorsa, bir kırmızı kan hücresine karşı reaksiyona girecektir.

Böyle bir durumda, o belirli antijenik proteine sahip kırmızı kan hücreleri, antikorlara sahip olan kişiye verilemez, çünkü reddedilir. Çapraz reaksiyonların önemi burada yatmaktadır.

Çapraz eşleştirme ne için?

Farklı bireylerin kanını minör antijenlere göre gruplamak imkansız olduğundan, bir kişinin kanında başka bir kişinin kırmızı kan hücrelerinin minör antijenlerine karşı antikorlar olup olmadığını anlamanın tek yolu çapraz uyumdur. .

Antikorların mevcut olduğu durumlarda, bir hemoliz veya aglütinasyon reaksiyonu tetiklenir, bu nedenle reaksiyonun pozitif olduğu sonucuna varılır; yani, küçük antijenlere karşı antikorlar vardır (hangisi olduğu tam olarak bilinmese de). Aksi takdirde test negatiftir.

temel

Çapraz eşleşmeler, antijen-antikor reaksiyonuna dayanır. Bu nedenle, onlarla, bir alıcının serumunda, bir antijen-antikor reaksiyonunu indükleyen, donörün kırmızı kan hücrelerinin antijenlerine karşı antikorlar olup olmadığını (veya tam tersi) tespit etmek mümkündür.

Antikor yoksa, reaksiyon oluşmaz ve test negatif olarak bildirilir. Aksine, reaksiyon pozitif ise (test sırasında hemoliz veya aglütinasyon varsa) antikorların mevcut olduğu sonucuna varılabilir.

Bu bağlamda, hem verici hem de alıcı serumda kırmızı kan hücrelerine karşı antikorların olabileceğine dikkat etmek önemlidir. Bu nedenle iki tür çapraz reaksiyon vardır.

Çapraz reaksiyon türleri

Verici eritrositlere karşı antikorlar hastanın serumunda bulunabilir; ancak bunun tersi de olabilir, yani donörün serumunda hastanın kırmızı kan hücrelerine karşı antikorlar.

Bu nedenle iki tür çapraz karşılaştırma vardır:

- Büyük çapraz karşılaştırma.

- Küçük çapraz karşılaştırma.

Her iki tip de kan ürünlerini nakletmeden önce kan bankasında rutin olarak yapılır, çünkü testlerden herhangi biri pozitif çıkarsa, hastanın yaşamını tehlikeye atabilecek yüksek transfüzyon reaksiyonları riski vardır.

Büyük çapraz karşılaştırma

Bu test, alıcının serumunun vericinin kırmızı kan hücrelerine karşı antikor içerip içermediğini değerlendirir.

Bu meydana gelirse, hastanın plazmasında bulunan büyük miktarda antikor, donörün kırmızı kan hücrelerini çok hızlı bir şekilde yok edeceğinden ve bu süreçte alıcının vücudunda yıkıcı reaksiyonlar oluşturacağından, kan ürünleri uygulanamaz. Bu reaksiyonlar o kadar şiddetlidir ki, yaşamı tehdit edebilir.

Küçük çapraz karşılaştırma

Bu durumda vericinin serumunda alıcının kırmızı kan hücrelerine karşı antikor olup olmadığı belirlenir.

Eğer öyleyse, antikorlar alıcının eritrositlerini yok etmeye başlayacaktır. Bununla birlikte, antikor miktarının sınırlı olduğu göz önüne alındığında, reaksiyon daha az yoğundur; yine de tehlikeli olmasına rağmen.

Aşamaları

Hem büyük hem de küçük çapraz karşılaştırma üç aşamaya ayrılır:

- Salin.

- Termal veya inkübasyon.

- Coombs.

İlk aşamada kırmızı kan hücreleri ve serum salin solüsyonunda karıştırılır. Daha sonra albümin eklenir ve numune son olarak coombs aşamasına geçmek için 37ºC'de 30 dakika inkübe edilir.

Teknik

Çapraz karşılaştırma tekniği, hastanın serumuna donör kırmızı kan hücrelerinin (majör çapraz karşılaştırma) ve alıcı eritrositlerinin donör serumuna (küçük çapraz karşılaştırma) eklenmesini içerdiğinden nispeten basittir.

Nispeten kısa bir sürede antijen-antikor reaksiyonunu indüklemek için, bir dizi standartlaştırılmış adım izlenmelidir. Bu adımlar aşağıda basitleştirilmiş bir şekilde özetlenmiştir.

Küçük uyumluluk testi için adımlar aynı olmasına rağmen, kırmızı kan hücrelerinin ve serumun kaynağının değiş tokuş edilmesine rağmen, sonraki bölümün ana uyumluluk testini açıkladığına dikkat etmek önemlidir.

Tuz fazı

- Test tüpüne alıcıdan 2 damla serum ekleyin (minör çapraz karşılaştırma ise donörden).

- Donörden kırmızı kan hücresi örneği alın (eğer küçük çapraz karşılaştırma ise alıcıdan).

- Kırmızı kan hücrelerini yıkayın ve santrifüjleyin.

-% 3 ile% 5 arasındaki bir çözelti içinde yeniden süspanse edin.

- Alıcının serumunu içeren tüpe bu solüsyondan bir damla koyun.

- Yavaşça karıştırın.

- Santrifüj.

- Sonucu ekran lambasında okuyun.

Termal aşama

- Salin fazının tamamlandığı tüpe 2 damla% 22 albumin ekleyin.

- 37 minutesC'de 30 dakika inkübe edin.

- 15 saniye santrifüjleyin.

- Sonucu ekran lambasında okuyun.

Coombs aşaması

- Hücreleri tüpten alın ve tuzlu su ile yıkayın.

- Süpernatantı ortadan kaldırın.

- İki damla Coombs reaktifi ekleyin.