- Basit boyamada kullanılan boyalar
- Basit boyama için 6 adım
- Aşama 1
- Gözlem
- Adım 2
- Gözlem
- Aşama 3
- 4. adım
- Gözlem
- Adım 5
- Referanslar
Tek boyama , basit olarak adlandırılır, yani, tek bir boya kullanıldığı bir boyama prosedürü, hızlı ve basittir. Esas olarak bir numunede bulunan hücrelerin morfolojisini ve organizasyonunu belirlemek için kullanılır.
Hücreler doğal olarak renksizdir, bu nedenle mikroskop altında bakıldığında onları bir şekilde görünür kılmak gerekir.
İnsan yanak hücreleri, basit metilen mavisi boyama ile boyandı.
Basit boyamada kullanılan boyaların, hücre duvarına ve sitoplazmaya kendiliğinden bağlanabilmeleri için pozitif yüklü (katyonik) bazik olması gerektiğini vurgulamak önemlidir.
Bu hücresel yapılar negatif yüklüdür. Bu nedenle, pozitif yüklü boya hücrelere çekilir ve kendiliğinden onlara bağlanır. Böylece, bir numunede bulunan tüm hücreler hızlı bir şekilde boyanır.
Basit boyamada kullanılan boyalar
Mikrobiyoloji laboratuvarında kullanılabilecek birkaç temel leke vardır. En çok kullanılanlar:
- Metilen mavisi.
- Kristal Menekşe.
- Malahit yeşili.
- Temel fuksin.
Bu boyaların tümü, pozitif yüklü (katyonik) renk iyonlarına (kromoforlar) sahip oldukları için bakterilerde iyi çalışır.
Bu lekelerin çoğu için boyama süreleri nispeten kısadır. Boyanın afinitesine bağlı olarak genellikle 30 saniye ile 2 dakika arasında değişir.
Bir numuneyi basit boyama ile boyamadan önce, uzatılması ve cam slayta (lama) sabitlenmesi gerektiğini unutmamak önemlidir; genişletilmiş ve sabitlenmiş numuneye smear denir.
Basit boyama için 6 adım
Aşama 1
Slaydı bir boyama askısına yerleştirin ve istenen boyayı uygulayın. Karşılık gelen zaman hareket etsin.
Basit boyama, kullanılan lekeye bağlı olarak tipik olarak birkaç saniye ila birkaç dakika sürer.
Gözlem
Bu adımda, kullanılan boya için tavsiye edilen sürenin aşılmaması önemlidir, çünkü tabakada kristaller oluşabilir ve hücrelerin morfolojisini bozan "yapay ürünler" olarak bilinen şeyleri üretir.
Adım 2
Akıntı berraklaşana kadar slayttaki lekeyi bir şişeden damıtılmış suyla veya yavaşça akan musluk suyuyla iyice yıkayın. Bu genellikle 5-10 saniye sürer.
Gözlem
Aynı kuvvetin numuneye zarar vermesini önlemek için su akışını doğrudan smear üzerine uygulamayın.
Damıtılmış suyunuz yoksa lekelenme sonucunu etkilemeyeceği için sorunsuz musluk suyunu kullanabilirsiniz.
Aşama 3
Slaytı emici kağıt havlularla tek yönde ve ovalamadan kurulayın. Slaytın alt tarafının temiz olduğundan emin olun.
4. adım
Mikroskop altında lekeli bulaşmayı gözlemleyin. Daha ayrıntılı olarak gözlemlemek istediğiniz alanı doğru bir şekilde bulmak için en uzak hedeflerle başlayın. Örneğe yaklaşmak için hedefi değiştirin.
Gözlem
Daha yüksek bir büyütmeyle (normalde 100X) objektif kullanımı için, ışığın daha iyi nüfuz etmesine yardımcı olduğu ve görüntü daha keskin görüneceği için daldırma yağı kullanılmalıdır. Bir lamel kullanmak gerekli değildir.
Adım 5
Son olarak, tüm örnekleri uygun şekilde "biyolojik tehlike" olarak etiketlenmiş uygun bir kapta atın.
Referanslar
- (2001). Mikrobiyolojik Uygulamalar: Genel Mikrobiyoloji Laboratuvar El Kitabı (8 inci ed.). McGraw-Hill Şirketleri.
- Harisha, S. (2006). Pratik Biyoteknoloji An Introduction to (1 st ). Güvenlik Duvarı Ortamı.
- Moyes, RB, Reynolds, J. ve Breakwell, DP (2009). Bakterilerin ön boyanması: Basit lekeler. Mikrobiyolojide Güncel Protokoller, (SUPPL. 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Mikrobiyoloji Laboratuarı (10 Alcamo en Temelleri inci ). Jones & Bartlett Öğrenimi.
- Prescott, H. (2002). Mikrobiyolojide Laboratuvar Çalışmaları ( 5. ). McGraw-Hill Şirketleri.
- Sumbali, G. ve Mehrotra, R. (2009). Mikrobiyoloji (1 İlkeleri st ). Tata McGraw-Hill Eğitimi.