- Bu ne için?
- temel
- Hastanın yaşına göre
- Mikroorganizma türüne göre
- süreç
- Örnekleme için öneriler
- Numune Miktarı
- Örnekleme
- Örneklemeden önce asepsi
- Örnek ekstraksiyon
- Kültür
- Sonuçlar
- Kan kültürünün pozitif mi yoksa kontaminasyon mu olduğu nasıl anlaşılır?
- Referanslar
Kan kültür kan mikroorganizmaların varlığını tespit etmek için çalışan bir bakteriyolojik bir testtir. Kan, doğası gereği steril bir sıvıdır ve bu nedenle fizyolojik koşullar altında tutulmalıdır, bu nedenle kandaki bakteri veya mantar varlığı her zaman patolojiktir.
Kanda bakteri veya mantarlar bulunduğunda, ancak çoğalma mikroorganizmaların bağışıklık sistemi tarafından ortadan kaldırılmasını aşmadığında, buna bakteremi (bakteriler için) veya fungemi (mantarlar için) denir; Ancak mikroorganizmaların sayısı kontrolsüz bir şekilde artarsa septisemi denir.
Kan kültürü şişeleri (sarı: pediatrik aerobiosis, yeşil: yetişkin aerobiyozu ve kırmızı: yetişkin anaerobiyozu). Kaynak: fotoğraf yazar MSc Marielsa Gil tarafından çekilmiştir.
Bakteriyemi, fungemi ve septisemi hastanın yaşamını tehlikeye atar ve bu nedenle derhal tedavi edilmelidir. Bu nedenle, kanda enfeksiyon şüphesi olduğunda doktorlar kan kültürü çalışması talep etmektedir.
Bu bakteriyolojik analiz, kanda bir enfeksiyon olup olmadığını ve ilgili mikroorganizmanın hangisi olduğunu bilmeyi sağlar. Ayrıca pozitif çıkarsa tedavide hangi antibiyotik veya antifungal kullanılabileceğini bilmek için duyarlılık testi yapılır.
Öte yandan, kan kültürü 24 saatlik inkübasyonda negatif ise 240 saat negatif olana kadar atılmamalıdır. Bu, yavaş büyüyen mikroorganizmaların olmamasını sağlar.
Kan kültürünün güvenilir olması için, numune alırken aşırı aseptik önlemler alınmalı ve testin güvenilirliğini ve duyarlılığını arttırmak için ateşin zirvesi sırasında veya yakınında en az iki numune alınmalıdır.
Bu ne için?
Kan steril bir sıvıdır ve içinde mikroorganizmalar bulunduğunda% 100 patolojiktir. Bu durum, hastanın hayatını tehlikeye atan çok hassas bir klinik tabloyu temsil etmektedir.
Kan kültürü, kan dolaşımında mikroorganizmaların varlığını tespit eden önemli bir bakteriyolojik testtir.
Mikroorganizmalar, diğerlerinin yanı sıra pnömoni, karın içi enfeksiyonlar, piyelonefrit, ciddi deri enfeksiyonları, yumuşak dokular veya artrit gibi ekstravasküler enfeksiyonlar olabilen farklı yollarla kana ulaşabilir.
Veya intravenöz yolla, örneğin intravenöz veya arteriyel kateter kontaminasyonu, endokardit, intravenöz ilaç bağımlılığı, kontamine ilaçların veya solüsyonların verilmesi vb.
Sepsise neden olan ajanın zamanında tespit edilmesi ve tedavi edilmesi hastanın hayatta kalmasını sağlamak için çok önemlidir.
Bu anlamda, doktor septisemi şüphesi uyandıran belirti ve semptomları gözlemlediğinde kan kültürünün gerçekleştiğini belirtmelidir, örneğin: belirgin bir bulaşıcı odak olmaksızın ateş (38 ° C'nin üzerinde) veya tam tersine hipotermi (<de 36 ° C).
Diğer işaretler olabilir: titreme, beyaz kan hücreleri sayımında belirtilen bir artış (> 10,000 hücre / mm 3 ) veya polimorfonükleer önemli bir azalma hücreleri (<1,000 PMN / aa 3 ). Diğer uyarı işaretlerinin yanı sıra birden fazla organ bozulması veya aniden canlılık kaybı gibi.
Bakteriyemi sabit, geçici veya aralıklı olabilir. Bu, örnekleme için önemlidir, çünkü dolaşımdaki mikroorganizmayı bulma olasılığı daha yüksek olduğunda onu almak gerekir.
Bu nedenle farklı yerlerden en az 2 numune alınması tavsiye edilir. Ek olarak, ideal olan, örneğin ateşli zirvelerde veya hastada titreme, aşırı hipotermi, terleme veya taşikardi ortaya çıktığında alınmasıdır.
Bununla birlikte, kan kültürünün gerçekten yararlı bir araç olması için numunenin son derece dikkatli alınması gerekir. Numuneyi alırken kötü bir manipülasyon veya kötü bir asepsi, testi geçersiz kılarak yanlış pozitifler elde edebilir.
temel
Çalışma, aseptik olarak iki veya üç kan örneği alınarak özel şişelere yerleştirilmesinden oluşur.
Kan örneklerinin kültürlenmesi için özel cihazlara kan kültürü şişeleri denir. Bunlar şu şekilde sınıflandırılır:
Hastanın yaşına göre
-Pediatrik kullanım
-Yetişkinler için.
Mikroorganizma türüne göre
-Aerobik mikroorganizmalar için şişeler (aerobik bakteriler, fakültatif bakteriler ve mantarlar).
-Anaerobik mikroorganizmalar için kan kültürü şişeleri (katı anaerobik bakteriler).
Bazıları bir sıvı kültür ortamı içerir ve bazıları aynı zamanda bir katı ve sıvı kültür ortamı içerir. Aynı zamanda aktif karbon parçacıklarıyla da bulunurlar.
süreç
Örnekleme için öneriler
- Mikrobiyoloji alanında yüksek eğitimli ve eğitimli personel tarafından alınacak numune.
- Asepsi veya numune toplama yerinin derinlemesine temizlenmesi şüphesiz en önemli adımdır.
- Tüm örneklemelerde olduğu gibi, sağlık personeli işlem sırasında biyogüvenlik önlemlerine tam olarak uymalıdır (diğerleri arasında eldiven, önlük, gözlük kullanımı).
- Numune almak için gerekli tüm araçların mevcut olmasına dikkat edin.
- Şişeleri hastanın tam adı, tarihi, tıbbi kayıt numarası, numune alma zamanı ve laboratuvar sıra numarasıyla etiketleyin.
-İdeal olan, numuneyi hasta antimikrobiyal tedaviye başlamadan önce almaktır. Sadece devam eden tedavinin çalışmadığından şüpheleniliyorsa endikedir. Bu durumda ilaç değişiminden önce antibiyotik inhibitörü içeren kan kültürü şişeleri (aktif karbon parçacıkları) kullanılarak numune alınmalıdır.
- Sağ kol ve sol kol gibi farklı anatomik bölgelerden en az 2 numune alınmalıdır. Endokardit şüphesinde 3 numune önerilir. Her numuneye iki şişe dahil edilecektir (biri aerobiosis ve diğeri anaerobiosis için).
Numune Miktarı
Numune miktarı hastanın yaşına göre değişir, ancak 1: 5 ila 1:10 oranı, kan / kültür sıvı dilüsyonuna göre her zaman korunmalıdır.
Yenidoğanlarda önerilen numune miktarı flakon başına 1 ml kandır. Pediatrik şişe kullanılmaktadır.
Bir ay ile bir yaş arasındaki bebeklerde, şişe başına 1,5 ml kana yükseltilebilir. Pediatrik şişe kullanılmaktadır.
2 yaşından büyük çocuklarda uygun numune miktarı flakon başına 2,5 ml kandır. Pediatrik şişe kullanılmaktadır.
Ergenlik döneminden itibaren şişe başına 5-10 ml kan hacmine yükseltilebilir. Yetişkin bir şişe kullanılır.
Son olarak, yetişkin aşamasında, gerekli miktar şişe başına 8-10 ml'dir. Yetişkin bir şişe kullanılır.
Örnekleme
- Kan örneği venöz veya arteriyel olabilir. Bununla birlikte, arteriyel kan yalnızca venöz örnekleme imkansız olduğunda alınır.
- Aşağıdaki durumlar haricinde santral venöz kateterden örnek alınması tavsiye edilmez:
- Örneği periferden (venöz veya arteriyel) almak imkansızdır.
- Kanama riski taşıyan hastalar.
- Doktor, santral venöz kateter kontaminasyonu nedeniyle bakteremiden şüphelenirse.
- Hastanın antimikrobiyal tedavi alıp almadığına bakılmaksızın 4 ila 5 günlük ateşli bir kesilmeden sonra ateş tekrar ortaya çıktığında.
Örneklemeden önce asepsi
- Örnekleme için anatomik siteleri seçin. Genel olarak, en iyi kalibreli damarlar seçilir (bazilik veya sefalik damar).
- Atlanta'daki (ABD) Hastalık Kontrol Merkezlerine (CDC) göre, operatör eldiven takmanın yanı sıra numune almadan önce ellerini% 2 klorheksidin veya% 10 povidon iyotla yıkamalıdır.
-Kullanılacak damarı palpe edin ve bulun.
Sabunlu klorheksidin veya antiseptik sabun kullanarak merkezden dışarıya doğru hareketler yaparak delinme alanını dönen bir şekilde temizleyin. Steril salinle durulayın.
Ardından bir antiseptik uygulayın ve etki etmesine izin verin. Örnek 1 dakika için% 0.5 klorheksidin glukonat veya 2 dakika için% 10 povidon iyot. İkincisi için, önce hastanın iyota alerjisi olup olmadığını sorun. Alerjiniz varsa,% 70 alkol kullanabilirsiniz.
Örnek ekstraksiyon
- Kan akışını arttırmak ve damarı filizlendirmek için turnikeyi yerleştirin.
- Delinme bölgesine tekrar parmağınızla dokunmayın. Bu kesinlikle gerekliyse, parmak delinme alanıyla aynı şekilde yıkanmalıdır.
Enjektör iğnesini veya kafa derisini vene sokun ve gerekli miktarda kanı alın.
-Steril değilse çıkarırken iğne üzerine pamuk veya gazlı bez koymayınız.
-Kapağa dokunmadan çok dikkatli bir şekilde şişelerden güvenlik mührünü çıkarınız. Bazı yazarlar, numuneyi aşılamadan önce kapağın dezenfekte edilmesini önermektedir.
- Şişelere uygun miktarda kan dağıtın. Numune bir enjektör ile alınırsa, gerekli miktar önce anaerobik şişeye ve ardından aerobik şişeye boşaltılır. Saçlı deri (kelebek) ile alım yapılırsa ters yönde dökülür.
- Kan kültürü şişesini ters çevirerek yavaşça karıştırın.
- Eldivenleri değiştirin ve ikinci numune alımı için önceki adımları tekrarlayın.
-İkinci numune farklı bir bölgeden alınmışsa hemen yapılabilir ancak aynı sahadan ise bir numune ile diğeri arasında 30 ila 90 dakika beklemeniz gerekir.
- Numune mümkün olan en kısa sürede laboratuvara götürülmeli, bu mümkün değilse oda sıcaklığında 18 saate kadar bırakılmalıdır.
Kültür
Laboratuvara girdikten sonra, şişeler her şişenin koşulları altında, yani sırasıyla aerobiosis ve anaerobiosis'de 37 ° C'de inkübe edilir.
Manuel yönteme göre, zil sesi 24 saatlik inkübasyonda başlatılmalı ve ardından her gün çalmalıdır. Halkalar şu şekilde gerçekleştirilir: önce şişe kapağı dezenfekte edilir ve steril bir enjektörün iğnesi yerleştirilir. Sıvı şişeden ekstrakte edilir ve kanlı agar ve çikolata agarına ekilir.
Büyüme varsa, bir Gram yapılır, belirli ortamlarda alt kültürler, biyokimyasal testler ve antibiyogram yapılır.
Otomatik yöntemlerde Bact / Alert ekipmanı, bir şişenin pozitif olduğunu tespit ettiğinde bir alarm verir. Aynı şekilde kanlı agara ve çikolata agara da vurulmalıdır.
Yer kazanan diğer bir yöntem, şişeyi 6 saatlik inkübasyondan sonra kütle spektrometresi ile analiz etmektir. Bu yöntem, teşhisin duyarlılığını ve hızını artırmaya yardımcı olmuştur.
Sonuçlar
Kan kültürü şişesi negatif olduğu sürece tedavi eden hekime ön ara raporlar verilebilir. Rapor, kuluçkaya yattığı saatlerde olumsuz olduğunu gösteriyor. Örneğin dördüncü güne kadar negatif çıkarsa şu şekilde raporlanır:
Ön sonuç: 96 saatlik inkübasyonda negatif kültür.
Not: çalışma 240 saat devam ediyor.
Kan kültürü pozitif ise, tedavi eden hekime derhal bilgi verilir ve koloninin en az gramını içeren bir rapor gönderilir. Misal:
Ön sonuç: 48 saatlik inkübasyonda pozitif kültürde gram negatif basil ve negatif oksidaz gözlenir. Tanımlama ve hassasiyet testleri devam ediyor.
Bu bilgi, tedavi eden hekime, laboratuvarın nihai sonucunu beklerken olası mikroorganizmaya yönelik deneysel bir tedaviye başlaması için rehberlik eder.
Bakteriyolojik çalışma tamamlandıktan, yani mikroorganizma tespit edildikten ve antibiyogram hazır olduktan sonra son rapor en kısa sürede gönderilmelidir.
Hedef organizma Neisseria gonorrhoeae veya Neisseria meningitidis ise özel dikkat gösterilmelidir, çünkü bu bakteriler yüksek konsantrasyonlarda sodyum polianetosülfonat (SPS) varlığında inhibe edilir.
Bu nedenle bu bileşik kan kültürü şişelerinde% 0,025'i geçmemelidir.
Öte yandan, kan kültürü örneği ilk olarak Vacutainer tüplerinde alınırsa, bu tüpler meningokok ve gonokoklara toksik SPS konsantrasyonlarına sahiptir, bu nedenle kan 1 saat içinde broth kültür sistemine aktarılmalıdır.
Kan kültürünün pozitif mi yoksa kontaminasyon mu olduğu nasıl anlaşılır?
Alınan toplam kan kültürü flakonundan yalnızca bir kan kültürü flakonunda üreme olduğunda bir kan kültürü kontamine olarak kabul edilir. İzole edilen mikroorganizma normal bir cilt mikrobiyotası ise kontaminasyon şüphesi artar: örnek: diğerleri arasında koagülaz negatif Staphylococcus, Propionibacterium spp.
Bununla birlikte, immün sistemi baskılanmış hastalarda hiçbir mikroorganizma ihmal edilmemelidir, ancak bu durumda mikroorganizma birkaç örnekte görünmelidir.
Öte yandan iki farklı örnekte izole edilen aynı mikroorganizmanın antibiyotiklere duyarlılığı aynı ise enfeksiyon gerçektir.
Diğer bir özellik, kontamine kan kültürleri geç büyüdüğü için bakteri yüküdür, tedavi edilmeyen hastalarda gerçek enfeksiyonlar genellikle mikroorganizmanın rahatsız edici olmadığı 14 saatlik inkübasyonda pozitiftir.
Öte yandan, antimikrobiyallerle tedavi edilen hastalarda, ilgili mikroorganizmanın büyümesi zaman alabilir çünkü yük çok düşüktür.
Birden fazla mikroorganizmanın ortaya çıkması kontaminasyonu düşündürebilir, ancak aynı sonuç farklı yerlerden birkaç çekimde tekrarlanırsa gerçektir.
Referanslar
- "Kan kültürü." Vikipedi, bedava ansiklopedi. 3 Temmuz 2019, 17:28 UTC. 14 Tem 2019, 19:05 en.wikipedia.org
- Hervé B. Mikrobiyolojik tanıda yeni teknolojiler: otomasyon ve mikrobiyal tanımlama ve duyarlılık çalışmasında bazı uygulamalar. Rev. Med Clin. Sayımlar. 2015; 26 (6) 753-763. Reader.elsevier.com'da mevcuttur
- Villarroel P. Bölüm 20: Sepsis ve kardiyovasküler hastalık riski. Kardiyovasküler sağlık. s. 187-194. Mevcut: fbbva.es
- Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Kan kültürleri: Size ne söylediler ve ne yaparsınız? Hasta topak. 2012; 11 (26): 146-163. Mevcut: scielo.isc
- Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Pozitif bir kan kültürü elde etme başarısı olasılığı. Med Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Mevcut: scielo.org