- temel
- Hazırlık
- kullanım
- Numune türleri
- Örnekleme
- Numunenin tanımlanması
- Aktar
- Cary Blair ulaşım aracında yürütülen soruşturmalar
- QA
- Referanslar
Ortalama Cary Blair bağırsak patojenleri, mikroorganizmaları ve anaerobik kararsız yataklık biyolojik numunelerin taşınması ve korunması için kullanılan bir yarı katı ağar vardır. Tüm taşıma araçları gibi, işlevi de, kültürlenene kadar numuneyi en uygun koşullarda tutmaktır. Mevcut patojen mikroorganizmalar ve bunlara eşlik eden mikrobiyotalar, popülasyonlarını artırmadan canlı kalmalıdır.
Cary Blair Medium, Stuart Transport Medium'un formülasyon değişikliğinin bir sonucudur. Değişiklik 1964'te gerçekleştirildi ve pH düzenleyici sistemin (gliserofosfat) fosfatlı inorganik bir tamponla değiştirilmesinden oluşuyordu.
A. Cary Blair Medium ile Culturette B. Cary Blair Medium ile Dışkı Toplayıcı. Kaynak: A. Video Meganhow, yara kültürü edinin 2011 youtube.com B. Kullanıcı: Mattes
Yeniden formülasyon gerekliydi çünkü yaratıcıları, gliserofosfatın belirli bir süre sonra bazı saprofitik bakteriler tarafından metabolize edilebileceğini fark ettiler. Bunlar, mevcut patojenlerle çoğalır.
Diğer değişiklikler metilen mavisinin ortadan kaldırılması ve pH'ın alkaliliğe (pH 8.4) doğru yeniden ayarlanmasıydı. Tüm bu değişiklikler, ulaşım araçlarının verimliliğini artırdı.
Başlangıçta Cary Blair besiyeri, Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae ve Campylobacter sp gibi bağırsak patojenlerinin bakımı için kullanıldı.
Bununla birlikte, Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae ve bazı anaeroblar gibi zorlu ve kararsız patojenlerin canlılığını korumadaki etkinlik daha sonra görülmüştür.
temel
Cary Blair Medium, sodyum klorür, sodyum tiyoglikolat, disodyum fosfat, kalsiyum klorür ve agar içerir.
Sodyum klorür ortamın ozmotik dengesini korur, disodyum fosfat ve kalsiyum klorür pH'ı dengeler. Kendi payına, sodyum tiyoglikolat düşük bir oksidasyon-indirgeme potansiyeli sağlarken, agarın küçük kısmı yarı katı kıvam sağlar.
Cary Blair besiyeri besleyici maddeler içermez, çünkü bir taşıma ortamının işlevi numuneyi nem ve mikrobiyal yük açısından değişikliklere uğramadan tutmaktır; yani, mevcut mikroorganizmaların canlılığını ve miktarını korurken numunenin dehidrasyonunu önler.
Son olarak, hafif alkali pH, asitlik nedeniyle mikroorganizmaların ölmesini önler, özellikle Vibrioslar asitlere karşı çok hassastır.
Hazırlık
Cary Blair ortamı, özel bir kullanıma hazır cihaz olarak ticari olarak mevcuttur. Taşıma sistemi plastik bir Peel Pack çantasıyla kaplıdır. İçinde örneği toplamak için bir swab ve Cary Blair'in yarı katı besiyeri için kap tüpü içerir.
Ayrıca piyasada, laboratuarda hazırlanması için susuz ortam sağlayan ticari evler bulunmaktadır.
Bunu yapmak için, 13.2 g susuz ortam tartın ve bir litre damıtılmış su içinde çözün. Tamamen eriyene kadar preparatı ısıtın ve sallayın. Besiyerini vidalı kapaklı test tüplerine (Bakalit) dağıtın.
Tüpleri 15 dakika buğulayın. Soğumaya bırakın ve kullanıma kadar oda sıcaklığında tutun.
İnoküle edilmemiş Cary Blair besiyeri, oda sıcaklığında 18 aya kadar optimum şekilde saklanabilir.
Ortamın pH'ı 8,4 ± 0,2'ye ayarlanmalıdır. Hazırlanan besiyerinin rengi belli bir opaklıkla bejdir.
kullanım
Numune türleri
Cary Blair Medium, dışkı örnekleri, rektal swablar ve vajinal swablar hemen işlenemediğinde kullanılır.
Nakil yolu olmadığında numuneler -70 ° C'de saklanabilir.
Örnekleme
Eküvyon numune ile emprenye edilir ve tabana ulaşmadan Cary Blair besiyerine sokulur.
Numunenin tanımlanması
Cary Blair besiyerinde, hastanın adı ve soyadı, numunenin kimlik numarası, numune toplama kaynağı, tedavi eden hekim, toplama tarihi ve saati gibi temel verilerin yerleştirildiği bir etiket olmalıdır. örnek, varsayımsal tanı, antibiyotik tedavisi.
Aktar
Dışkı örneklerinde sıkıca kapatılır ve oda sıcaklığında taşınır. Anaerobik mikroorganizma arayışındaki vajinal numuneler için ise numunelerin 4 ° C'de taşınması tavsiye edilir.
Her durumda, önerilen transfer süresi maksimum 24 saat olmak üzere 4-6 saattir.
Dışkı örneklerinde Campylobacter jejuni varlığından şüpheleniliyorsa ve bunlar 24 saat içinde işlenemiyorsa, Cary Blair besiyerinde 4 ° C'de saklanması önerilir.
Cary Blair ulaşım aracında yürütülen soruşturmalar
Birkaç çalışma, Cary Blair besiyerinin Shigella ve Salmonella cinsinin enteropatojenik mikroorganizmaları için numuneyi aldıktan sonra 49 güne kadar canlı kalabileceğini göstermiştir.
Diğer bir önemli bağırsak patojeni olan Vibrio cholerae ise 22 gün yaşayabilirken, Yersinia pestis (hıyarcıklı ve pnömonik vebanın etken maddesi) 75 gün sonra iyileşebilir.
Ancak, bu mikroorganizmaların geri kazanımı açısından kanıtlanmış dayanıklılığa rağmen, alınan örneklerin Cary Blair besiyerinde mümkün olan en kısa sürede laboratuvara nakledilmesi önerilir.
Benzer şekilde, numune laboratuvara ulaştığında, ilgili kültür ortamına gecikmeden tohumlanmalıdır.
Öte yandan, Cary Blair besiyeri, fakültatif mikroorganizmaların taşınması için yararlı olmasının yanı sıra, anaerobik patojenler içeren örnekler için de önerilir.
Bu anlamda, DeMarco ve arkadaşları 2017 yılında ticari olarak mevcut üç taşıma sisteminde vajinal mikroorganizmaların hayatta kalması başlıklı bir çalışma yürüttü.
Cary Blair Transport Medium'un vajinal anaerobik mikroorganizmaların korunması ve geri kazanımı için en iyi taşıma besiyeri olduğunu gösterdiler. Aynı şekilde, transfer sıcaklığı 4 ° C olduğunda en yüksek geri kazanım oranının elde edildiğini gösterdiler.
Bu nedenle vajinal sürüntülerin (anaerobik mikroorganizmalar) nakil sıcaklığının 4 ° C'de olması gerektiği sonucuna varılmıştır. İsteğe bağlı mikroorganizma arayışında dışkı örnekleri için ideal sıcaklık oda sıcaklığıdır.
QA
Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae ve Campylobacter sp.
Ortam, seçilen suş ile aşılanır ve 24 saat boyunca oda sıcaklığında tutulur. Daha sonra ilgili kültür ortamına ekilirler. Her durumda, söz konusu mikroorganizmanın tatmin edici bir şekilde geri kazanılması beklenir.
Referanslar
- DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, vd. Ticari olarak temin edilebilen üç taşıma sisteminde vajinal mikroorganizmaların hayatta kalması. Anaerob. 2017; 45: 44–49.
- Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Dışkı örneklerinin depolanması için koruma ortamının karşılaştırılması. J Clin Microbiol. bindokuzyüz doksan beş; 33 (8): 2176–2178.
- Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Dışkı örneklerinin saklanması için saklama ortamı ve dondurma koşullarının karşılaştırılması. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik Tanı. 5. baskı. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
- Conda Pronadisa Laboratuvarları. Yarı Cary Blair. Condalab.com'da mevcuttur
- Metrix Laboratuvarı. Cary Blair. Mevcut: metrixlab.mx