STUART MEDIUM: KURULUŞ, HAZIRLIK VE KULLANIMLAR - BIYOLOJI - 2025

Orta Stuart biyolojik numunelerin taşınması için kullanılan besin olmadan yan katı agar veya et suyu, bir. Amacı, mikrobiyal popülasyonu artırmadan, numunede bulunan suşları belirli bir süre canlı tutmaktır.

1948'de Moffet, Young ve Stuart tarafından yaratıldı ve daha sonra Toshach ve Patsula tarafından değiştirildi. Sodyum gliserofosfat, sodyum tiyoglikolat, kalsiyum klorür ve agar-agardan oluşur. İkincisi, yarı katı ortamda bulunur ve sıvıda yoktur. Bazı laboratuvarlar buna metilen mavisi ekler.

Stuart nakliyesi ile Culturette. Kaynak: Yazan: CDC / Dr. Gilda Jones, İzniyle: Halk Sağlığı Resim Kitaplığı

Genellikle numunenin hemen ekilmesinin mümkün olmadığı durumlarda kullanılırlar. Bu durumda numune, kültürü işleyecek laboratuvara aktarılırken taşıma ortamına yerleştirilir.

Bu şekilde, mevcut mikroorganizmaların, ilgili kültür ortamında aşılanana kadar canlı kalması garanti edilir.

Başlangıçta kullanımı, Neisseria gonorrhoeae varlığından şüphelenilen üretral veya vajinal örnekleri taşımak için tasarlanmıştı. Daha sonra, kullanışlılığının daha geniş olabileceğini anladılar.

Stuart besiyerinin diğerleri arasında Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis gibi kararsız ve güç üreyen mikroorganizmaların korunmasında çok etkili olduğu kanıtlanmıştır. Enterobacteria gibi diğer can sıkıcı olmayan mikroorganizmalara ek olarak.

Stuart besiyeri temelde numunenin kurumasını önler, ozmotik dengeyi sağlar ve mikroorganizmaları ideal bir pH'ta korur. Öte yandan, stratejik olarak bu besiyeri besin içermez, dolayısıyla mikroorganizmaların çoğalmasını önler.

Piyasada, bunu veya diğer taşıma araçlarını içeren, culturette adı verilen özel numune taşıma cihazları bulunmaktadır. Laboratuvarda da hazırlanabilirler.

temel

Stuart taşıma yönteminin amacı, numuneleri işlenene kadar orijinal durumlarına yakın tutmaktır.

Sodyum gliserofosfat ve kalsiyum klorür, pH ve ozmolariteyi koruyarak çalışan bir tampon sistemidir.

Bu arada, sodyum tiyoglikolat, indirgeyici bir ajan görevi görür ve agar içermesi durumunda, besiyerinin oksijenlenmesini geciktirmek için ona yarı katı bir kıvam verir. Son olarak, metilen mavisi bir oksidasyon göstergesidir, yani oksijen varlığını tespit eder.

Redoks göstergeli yarı katı ortam, anaerobik bakteri varlığından şüphelenilen numunelerin taşınması için idealdir.

Taşıma araçlarının özellikleri

Stuart ortamı, tüm ulaşım araçları gibi, aşağıdakileri içeren belirli özellikleri karşılar:

Çoğalmadan var olan canlı mikrobiyal suşları korur.

-Besin maddesi içermez; Bileşikleri, numuneyi yeterli pH ve ozmolarite koşullarında sulu tutmayı amaçlamaktadır.

-Pneumococcus gibi bazı hassas mikroorganizmaların otolizatını engeller.

-Kullanımı geçicidir, çok uzun sürmemelidir.

Hazırlık

Redoks göstergeli yarı katı Stuart orta

Ev hazırlığı

malzemeler

Sodyum gliserofosfat 10 gr

Sodyum tiyoglikolat 1.0 gr

Kalsiyum klorür 0.1 gr

Metilen mavisi 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Distile su 1 L

Bileşenleri karıştırın ve tamamen eriyene kadar ısıtın. Tüplere veya özel pamuklu çubuklara dökün. Otoklava sokulur ve 121ºC'de 15 dakika sterilize edilir. Tüpleri dikey konumda (blok şeklinde) soğumaya bırakın. Oda sıcaklığında saklayın.

Ticari ortam ile hazırlık

1 litre damıtılmış su içinde 14.1 g besiyerini tartın. Tamamen eriyene kadar sık ​​sık çalkalayarak kaynatılabilir. İşlemin geri kalanı daha önce açıklandığı gibi.

Kurutulmuş besiyeri krem ​​rengindedir ve hazırlanan yüzeyi mavi olmalıdır. Bu, metilen mavisinin varlığından kaynaklanmaktadır.

Ortamın pH'ı 7,4 ± 0,2'ye ayarlanmalıdır

Sıvı Modifiye Stuart Medium (ev yapımı)

malzemeler

Sodyum gliserofosfat 10 gr

Sodyum tiyoglikolat 1 gr

Kalsiyum klorür dihidrat 0.1 gr

Distile su 1000 ml

Yarı katı ile aynı bileşenlere sahiptir, ancak agar veya metilen mavisi içermez. Bu durumda bileşenler ısıtılmadan karıştırılır ve 0,5 ml vidalı kapaklı 16 x 125 mm tüplere dağıtılır.

Otoklavda 121 ° C'de 10 dakika sterilize edilir. Örnekleme için, örnek PCR içinse dakron swabları veya kültür içinse rayon kullanılmalıdır.

Tüpler oda sıcaklığında saklanır.

Uygulamalar

Ticari olarak, culturette adı verilen özel numune taşıma cihazları vardır; Bu cihaz, içinde bir sürüntü bulunan uzun, ince bir tüptür ve sonunda yarı katı veya sıvı Stuart ortamını içeren bir segment vardır.

Cihaz açılır ve swab ile numune alınır. Daha sonra, eküvyonun ucu yarı katı aktarım ortamına sokulana kadar tüpe geri verilir; Bazıları, ıslak tutulduğunda numunenin korunduğu sıvı Stuart ortamı ile emprenye edilmiş bir poliüretan sünger getirir.

Hassas mikroorganizmaların varlığından şüpheleniliyorsa, numuneyi toplamak için odun kömürlü pamuklu çubuklar kullanılmalıdır.

Swablar veya swablar ile alınabilen ve bu besiyerinde aktarılabilen örnekler faringeal eksüdalar, rektal swablar ve vajinal, üretral, yara, oküler, kulak ve apse dahil çeşitli sekresyonlardır.

Nakil ortamındaki numunenin laboratuvara aktarılması sırasında, ortamın aşırı çevresel koşullara (çok soğuk veya çok sıcak) maruz kalmasından kaçınılmalıdır. Atmosferik basınçtaki ani değişikliklerden de kaçınılmalıdır.

Ortamın bir mikroorganizmayı yaşayabilir durumda tutabildiği zaman, söz konusu türe bağlı olacaktır. Örneğin, Neisserias ve Haemophilus cinsinin mikroorganizmaları için 24 saate kadar canlı kalabilirler, ancak Salmonella veya Shigella gibi suşlar günler hatta haftalarca sürebilir.

Örnek işlemenin 4 günden fazla süreceği tahmin ediliyorsa, örneğin -70 ° C'de dondurulması tercih edilir.

Taşıma aracında numunenin tanımlanması

Hazırlanan taşıma aracı veya ticari kültür, aşağıdaki bilgilerin yerleştirileceği bir etikete sahip olmalıdır:

Hastanın adı ve soyadı: örnek karışıklığını önler.

Kimlik numarası: İş yerinde bir sipariş tutmak uygundur.

Örnek toplama kaynağı: Bakteriyoloğun uygun kültür ortamını seçmesine yardımcı olur.

Doktora gitmek: Bazen olası konsültasyonlar için gereklidir.

Numune toplama tarihi ve saati: Numunenin alınması ile laboratuvara alınması arasında geçen süreye göre numunenin kabulü veya reddi için gereklidir.

Eklenmesi çok faydalı olabilecek diğer bilgiler:

Varsayımsal tanı: şüpheli tanıya göre özel kültür besiyerinin eklenmesine rehberlik eder.

Antibiyotik tedavisi: Antibiyograma eklenmesinde fayda vardır.

Numunenin düzgün işlenmesini sağlamak için tüm bu bilgiler çok önemlidir.

QA

Stuart besiyerinin performansını değerlendirmek için bilinen suşlar aşılanabilir ve 25 ° C'de saklanabilir, örneğin: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Her durumda, söz konusu mikroorganizmanın 24 saat korunarak geri kazanılması beklenir.

Öte yandan, Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ve Escherichia coli ATCC 11775 gibi diğer suşlar da kullanılabilir.

Her durumda, 96 saate kadar bol miktarda iyileşme beklenir.

Sınırlamalar

Bazı çalışmalar, Stuart besiyerinde bulunan gliserofosfatın diğer Gram negatif bakteriler arasında bazı koliformlar tarafından metabolize edilebileceğini ve bu nedenle bu besiyerinde çoğalabileceğini garanti eder.

Bu risk, numune işleme ne kadar uzun süre ertelenirse artar. Aynı şekilde, Stuart ortamının nakliye sırasında yüksek sıcaklıklara maruz kalması bunu etkiler.

Referanslar

1. "Taşıma ortamı (mikrobiyoloji)." Vikipedi, bedava ansiklopedi. 13 Nisan 2018, 10:36 UTC. 1 Nisan 2019. Es.wikipedia.org adresinden ulaşılabilir
2. Microkit Laboratuvarları: Kültür Ortamı. Stuart Taşımacılığı. Mevcut: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuart'ın ulaşım aracı. Mevcut: lablinsan.cl
4. Bilimsel MDM. Stuart mikrobiyolojik taşıma ortamına sahip olmanın avantajları. Şu adresten ulaşılabilir: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratuvarları. Stuart. 2017. Şu adresten ulaşılabilir: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik Tanı. 5. baskı. Editoryal Panamericana SA Arjantin.