- Daldırma yağının bileşimi
- Daldırma yağı özellikleri
- Daldırma Yağı Temelleri
- Kullanımlar veya uygulamalar
- Daldırma yağı kullanarak bir müstahzarı gözlemleme adımları
- Bakım
- Referanslar
Daldırma yağ hem bir kırılma endeksi en yüksek olan viskoz berrak bir sıvıdır. Bu nedenle mikroskobun 100X objektifinden geçerken ışığı konsantre etme özelliği sağladığından ve çözme gücünü artırdığından mikroskobik gözlemlerde yaygın olarak kullanılmaktadır.
Bunun nedeni, objektif ile leke arasında viskoz bir film oluşması, ışık ışınlarının havaya ulaştıklarında dağılmasını engellemesi ve böylece ışık ışınlarını numuneye doğru yoğunlaştırmasıdır.
Yağa daldırmalı ve mikroskoplu damlalık, yağ daldırma kullanılarak 100X objektifle odaklanmıştır. Kaynak: Pixabay.com
Daldırma yağı yalnızca 100X hedefi ile kullanılır. Bu yüzden 100X hedefine daldırma hedefi de deniyor. Gerisi kuru hedefler olarak bilinir. Bu lens, daldırma yağı olmadan kullanılamaz, aksi takdirde görselleştirme tatmin edici olmaz.
Daldırma yağının ana işlevi, daha net, daha keskin ve daha belirgin görüntüler sağlamak ve diğer lenslerle mümkün olmayacak ayrıntıların gözlemlenmesine izin vermektir.
Bu amaçla kullanılan ilk yağ, Giovanni Battista Amici tarafından yaratılan ilk daldırma lensiyle birlikte kullanılan anason yağıydı. Bu yalnızca renk sapmasını önledi, ancak lens sisteminin sayısal açıklığını artırmadı.
Daha sonra sedir yağı kullanıldı, ancak kullanılmamasına neden olan birçok dezavantajı vardı. Bunların arasında, kısa vadede hedeflere zarar veren yüksek asitliği de vardı.
Daha sonra, organik maddelerin karmaşık bir bileşiği olan mevcut daldırma yağına ulaşana kadar azar azar rafine edilen sentetik daldırma yağları oluşturulana kadar su ve gliserin gibi diğer maddeler kullanıldı.
Daldırma yağının bileşimi
Daldırma yağı, terfenil, hidrojene terfenil, doğal hidrokarbonlar ve polibutenler gibi organik bileşiklerin bir karışımından oluşur.
Daldırma yağı özellikleri
Daldırma yağ özel bir kokuya sahip bir açık sarı sıvı, görünüş olarak hafif zor akışlı ve 0.99 g / cc 0.92 arasında bir yoğunluğu olan 3 .
Daldırma yağı suda çözünmez ve 340 ° C kaynama noktasına sahiptir. Kırılma indisi a (n 20 ° C / D): 1.482 - 1.516 arasında değişir. Bu arada, flaş indeksi 110 ° C'dir ve viskozite 100 ila 120 mPa.s. arasındadır.
Ekotoksik olduğu için bu ürün uygun şekilde atılmalıdır. Diğer bir deyişle, çevreye zararlıdır, esas olarak suda yaşayan hayvanları etkiler. Öte yandan cildi ve mukoza zarlarını tahriş eder. Yutulması halinde nefrotoksik ve kardiyotoksiktir.
Daldırma yağı, depolanması gereken sıcaklık olan 15 ila 25 ° C'de stabildir.
Daldırma Yağı Temelleri
Daha yüksek büyütme lensleri kullanırken, ışığın yoğunluğu artırılmalıdır. Bununla birlikte, ışık huzmelerinin çoğu, havaya ulaştıklarında (lamel ile mercek arasındaki boşluk) dağıldıkları için kaybolur ve hatta bazı ışınlar tamamen yansıtılır.
Daldırma yağının cama benzer bir kırılma indisi vardır. Bu nedenle, yağ 100X lens ile lamel arasına temas ettiğinde ışık huzmeleri yoğunlaşır.
Konsantre ışınlar numuneden geçer ve görüntüyü keskinleştirir, yani objektifin sayısal açıklığını arttırır ve kromatik ve küresel sapmalar için düzeltir.
Kullanımlar veya uygulamalar
Daldırma yağının kullanımı, bir görüntüyü daha geniş bir şekilde gözlemlemek gerektiğinde, bir tanı koymak için gerekli olan ayrıntıları görmek için en yüksek büyütme hedefini (100X objektif) kullanarak özellikle gereklidir.
Bu nedenle, histoloji, sitoloji, hematoloji ve bakteriyoloji gibi çeşitli alanlarda mikroskobik çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Örneğin, bir hastanın hücre ve dokularının özelliklerini incelemek için faydalıdır.
Mikroorganizmaların morfotintoryal özelliklerini tanımlamak için Gram preparatlarının yanı sıra eritrositlerin içindeki ve dışındaki hemoparazitlerin özelliklerini detaylandırmak istediğimiz kan yaymalarının analizi için de kullanılır.
Taze müstahzarlarda tavsiye edilmediğinden genellikle sabit müstahzarlarda kullanılır. Bunun nedeni, yağın yüzey geriliminin lamelin hareket etmesine neden olarak numunenin gözlem sırasında kaymasına ve analizi engellemesine neden olmasıdır.
Öte yandan, daldırma yağı sadece geleneksel ışık mikroskobunda yararlı değildir: aynı zamanda toplam iç yansıma floresan (TIRFM) mikroskoplarında ve konfokal floresan uygulamalarında da kullanılır.
Daldırma yağı kullanarak bir müstahzarı gözlemleme adımları
Bir slaytı mikroskop altında görüntülemek için, slayta önce en düşük büyütme hedefi, genellikle 10X, düşük ışık yoğunluğu ile odaklanılmalıdır.
Sonra 40X hedefine gider ve ışık yolu biraz artar. Bu büyütmede bazı analizler yapılabilir ancak yapısal detayları görmek için 100X büyütme gereklidir.
100X hedefine geçmeden önce, lamel üzerine, tam gözlemlemek istediğiniz yere bir damla daldırma yağı yerleştirilir ve ardından mikroskop tareti, hazırlıktaki 100x hedefini bulmak için hareket ettirilir.
Işığın yoğunluğu düzenlenir (arttırılır) (yoğunlaştırıcı hareket ettirilerek ve diyafram açılarak). Daha sonra mikrometre vidasının birkaç küçük hareketi (ileri veya geri), mikroskop parafokal hedefler kullanıyorsa mükemmel bir şekilde odaklanmalıdır.
Hazırlığı doğrudan daldırma lensi ile odaklamaya çalışırsanız, odağı bulmada sorun yaşayabilirsiniz. İmkansız bir eylem değil, ancak zorluk önemli ölçüde artıyor.
Bakım
Daldırma yağını kullanmak için belirli koşullar dikkate alınmalıdır.
Giemsa veya Gram ile lekelenmiş smear gibi renkli bir preparat yapıldığında, yağa daldırmadan önce smearın tamamen kurumasını bekleyin. Aksi takdirde, su ile birlikte yağ, preparatın görülmesine izin vermeyecek miseller oluşturacaktır.
Öte yandan, hazırlık partisini gözlemledikten sonra, yani çalışma gününün sonunda, 100X objektif etanollü bir lens kağıdı kullanılarak dikkatlice temizlenmelidir. Lens kirli bırakılırsa, yağ kurur ve ardından çıkarılması çok zorlaşarak görüş alanına zarar verir.
Aynı şekilde yağın yanıcı olduğu da dikkate alınmalı ve ısı kaynaklarından (çakmaklardan) uzak tutulmalıdır. 65 ° C'nin üzerinde ısıtmaktan kaçınmak önemlidir.
Son olarak, yağ toksik bir üründür. Bu nedenle, hafif tahrişe neden olabileceği cilt ve mukoz membranlarla doğrudan temastan kaçınılmalıdır. Kazaları önlemek için eldiven ve koruyucu gözlük kullanılması tavsiye edilir.
Yağ ile temas halinde bölge bol su ile yıkanmalıdır. Yağ göze sıçrarsa, gözleri açık tutarak aynı şekilde yıkanmalıdır. Kazara yutulması durumunda, en yakın doktora gitmenin yanı sıra ılık su yutulması ve kusturulması önemlidir.
Referanslar
- "Toplam İç Yansıma Floresan Mikroskobu." Vikipedi, bedava ansiklopedi. 30 Aralık 2018, 22:46 UTC. 14 Mayıs 2019, 01:54
- IVD. Mikroskopi Yağa daldırma. Şuradan ulaşılabilir: Kullanıcılar / Ekip / İndirmeler.
- Çevre Biyolojisi ve Mikrobiyoloji. Optik mikroskobun çalışması. Eumed.net/libros adresinde mevcuttur.
- Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Mikroskobun tarihçesi ve Mikrobiyolojiye etkisi. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Mevcut: scielo.
- Herrero J. Uygulama No. 1: Genel bileşik optik mikroskobun temelleri ve kullanımı. Universitat d´Alacant Mevcut: rua.ua.es/dspace
- Scharlau - MSDS. Mikroskopi için daldırma yağı. 2001. Insumos-labcentral adresinde bulunabilir.