Setrimid, agar ya da setrimiddir Pseudomonas aeruginosa izolasyonu için tasarlanan seçici bir katı kültür ortamıdır. Bu türün karakteristik pigmentlerinin üretimini göstermeye dayanmaktadır ve King, Ward ve Raney tarafından yaratılan Tech agar'ın modifikasyonundan yapılmıştır.
Orijinal formül magnezyum klorür, potasyum sülfat, jelatinin pankreatik sindirimi ve agar-agar tuzlarını içeriyordu. Formülün modifikasyonu, setrimid (setil trimetil amonyum bromür) ve gliserol ilavesinden oluşuyordu.
Pseudomonas aeruginosa ile tohumlanan Cetrimide agar Kaynak: BiotechMichael, Wikimedia Commons'tan
Cetrimide agar, Pseudomonas aeruginosa varlığından şüphelenilen örneklerin mikrobiyolojik çalışması için yararlıdır. Bu bakterinin son derece önemli olduğu unutulmamalıdır, çünkü normal çevresel mikrobiyotanın bir parçası olmasına rağmen, sıklıkla fırsatçı bir patojen gibi davranır.
Bu nedenle bu mikropların neden olduğu en yaygın sorunlardan biri nozokomiyal enfeksiyonlardır, yani hastane ortamında ortaya çıkan, bağışıklık sistemi baskılanmış hastalara saldıran enfeksiyonlardır.
Öte yandan, bu mikroorganizmanın neme olan yakınlığından dolayı en hassas kontaminasyon hedefleri şunlardır: destekli solunum cihazları, ilaçlar, nebülizerler, su kaynakları, klimalar, dezenfektanlar, sabunlu solüsyonlar, enjekte edilebilir solüsyonlar, açık yaralar , kateterler, idrar tüpleri ve diğerleri.
Bu anlamda, setrimid agar, daha önce bahsedilen elementlere mikrobiyolojik kontroller ve kültürler gerçekleştirmek için faydalıdır.
temel
Cetrimide agar, besiyerinin P. aeruginosa'nın büyümesini teşvik etme, pigmentlerinin üretimini uyarma ve dolayısıyla diğer mikroorganizmaların büyümesini engelleme kabiliyetine dayanmaktadır.
Bu özellikler, bileşenlerinin her birinin işlevinden kaynaklanmaktadır. Mevcut jelatin pepton bir nitrojen, vitamin ve mineral kaynağı görevi görür. Gliserol veya gliserin bir karbon kaynağı olarak çalışır.
Setrimid (setil trimetil amonyum bromür) ise aynı cinse ait diğer türler de dahil olmak üzere P. aeruginosa dışındaki bakterilerin büyümesini engelleyen maddedir.
İnhibisyon, cetramid'in katyonik bir deterjan görevi görmesi ve P. aeruginosa ve hayatta kalmayı başaran diğerleri dışında çoğu bakterinin plazma zarını istikrarsızlaştırmayı başarması nedeniyle oluşur.
Öte yandan magnezyum klorür ve potasyum sülfat içerir. Bu bileşikler, Pseudomonas aeruginosa'nın piyosiyanin, pyoverdin, pyorrubin, piyomelanin ve floresein dahil olmak üzere çeşitli pigmentler üretme kabiliyeti ile ilgili fenotipik ekspresyonu uyarır. Son olarak, katı bir kıvam veren agar-agar içerir.
yorumlama
Bu agarda elde edilen büyümenin yorumu şu şekilde gerçekleştirilir:
Mavi-yeşilimsi, yeşil, kahverengi veya kırmızımsı pigmentlerin üretilmesi ve ayrıca meyvemsi koku (aminoasetofenon) emisyonu ile düzenli kenarları olan yuvarlak, pürüzsüz kolonilerin gözlemlenmesi, söz konusu örnekte bu bakterinin varlığının olası bir sonucudur.
Öte yandan, koloniler üzerinde parlak yeşilimsi sarı bir pigmentin gözlemlenmesi, plaka ultraviyole ışığa maruz kaldığında P. aeruginosa'nın göstergesidir.
Ultraviyole ışık altında setrimid agar üzerinde P. aeruginosa kolonilerinin floresansı.
Gözlemlenen her rengin belirli bir pigment üretiminden kaynaklandığı unutulmamalıdır. Mavi-yeşil pigment, piyosiyanin üretimine, yeşil pyoverdine, kırmızımsı pyorubine, kahverengiden piyomelanine ve UV ışığı altında parlak sarı-yeşil flüoresan flüoreseine karşılık gelir.
Hazırlık
43 g susuz ortam tartılır ve damıtılmış suda çözülür. 10 ml gliserol ekleyin. Karışımı bir ısı kaynağına götürün. Tamamen çözülene kadar birkaç dakika kaynatın.
121 ° C'de 15 dakika otoklavlayın. Sıcaklık 50 ° C civarında olduğunda steril Petri kaplarında bekletin ve servis yapın.
Katılaşmaya, ters çevirmeye, plaquerolar içinde sipariş vermeye ve kullanıma kadar buzdolabında saklamaya izin verin. Cetrimide agar plakları ekimden önce buzdolabından çıkarılmalı ve oda sıcaklığına gelmeleri sağlanmalıdır.
Ortamın nihai pH'ı 7.2 ± 0.2 olmalıdır.
Susuz ortamın rengi bejdir ve preparasyon opak beyazdır.
Uygulamalar
Pseudomonas aeruginosa varlığından şüphelenilen her tür numune setrimid agar üzerine ekilebilir. Bu nedenle mikrobiyolojinin tüm alanlarında (çevresel, endüstriyel, klinik, su ve gıda) faydalıdır.
Hastane ortamlarının analiz edilmesi ve bu nedenle düzeltici önlemlerin alınabilmesi büyük önem taşımaktadır, çünkü bu mikroorganizma, hasta tarafından kullanılan kontamine ekipman, ilaçlar, solüsyonlar ve malzemeler yoluyla hastalara ulaşmaktadır.
Bu şekilde mikroorganizma bağışıklığı baskılanmış hastaların alt solunum yollarını, idrar yollarını ve yaralarını enfekte edebilir.
P. aeruginosa'nın koloni sayımı, mikrobiyal limit testlerinde de yapılabilir.
ekilen
Cetrimide agar, birincil kültür olarak kullanılabilir. Plaka, kenarlarından birine aşılanır ve oradan tükenerek plakanın geri kalanına dağıtılır. Sıvı numuneler bir drigalski spatula ile yüzeye tohumlanabilir.
Plakalar, 24 saat inkübasyon için 37 ° C'de aerobik olarak inkübe edilir.
Sınırlamalar
-Pseudomonas aeruginosas suşlarının küçük bir yüzdesi piyosiyanin üretmez, bu nedenle yanlış bir negatif yorumlanabilir.
-Bu besiyerinde klinik öneme sahip bazı Pseudomonas türleri inhibe edilmiştir.
-Pseudomonas aeruginosa için açıklanan özelliklere uyulmasına rağmen, ek tanımlama testleri ile desteklenmeleri gerekir. Kaçırılmaması gereken bir test oksidaz testidir, pozitif vermelidir.
-Bazı Enterobacteriaceae bu besiyerinde büyüyebilir ve sarı bir pigment geliştirebilir, ancak Pseudomonas aeruginosa'dan farklıdır, çünkü plaka ultraviyole ışığa maruz kaldığında floresans yoktur.
- Serratia marcescens, pembe bir pigment geliştirmeyi ve üretmeyi başarır.
-Cetrimide agar ile tohumlanan plaklar oda sıcaklığında bir süre bekletilirse P. aeruginosa suşları ultraviyole ışık altında gözlenen floresanı kaybedebilir, ancak 37 ° C'de tekrar inkübe edilirlerse özellik geri kazanılmış olur.
QA
Setrimid agarın iyi performansını analiz etmek için, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 ve Staphylococcus aureus ATCC 25923 gibi kontrol suşları kullanılabilir.
Beklenen sonuçlar:
- Mavi-yeşil pigment ve pozitif floresein ile P. aeruginosa için iyi gelişim.
- S. maltophilia ve S. aureus kısmen ila tamamen inhibe edilecektir.
- Escherichia coli'nin tamamen inhibe edilmesi bekleniyor.
Referanslar
- Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S.Pseudomonas aeruginosa'nın klinik izolatlarının fenotipik ve serolojik karakterizasyonu. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
- Conda Pronadisa Laboratuvarları. Setrimide agar bazı. 2014. condalab.com'da bulunabilir
- Britannia Laboratuvarları. Cetrimide agar. 2015. britanialab.com'da bulunabilir
- BD Laboratuvarları. BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013. Şu adresten ulaşılabilir: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratuvarı, CA Cetrimide agar. 2009. Şu adresten ulaşılabilir: http://f-soria.es