MACCONKEY AGAR: MANTIK, HAZIRLIK VE KULLANIMLAR - BIYOLOJI - 2024

MacConkey ağar Gram negatif bakterilerin özel izolasyon sağlayan bir katı ortamdır. Bu nedenle, seçici bir ortamdır ve laktozu fermente eden ve fermente etmeyen basilleri ayırt etmeye izin verir, bu da onu diferansiyel bir ortam yapar. Bir mikrobiyoloji laboratuvarında en yaygın kullanılan kültür besiyerinden biridir.

Bu besiyeri esas olarak, fırsatçı ve enteropatojenik türler dahil olmak üzere Enterobacteriaceae familyasına ait Gram negatif basillerin izolasyonu için kullanılır.

MacConkey agar, iki tür bakteri ile tohumlandı. Sol taraf laktoz fermente eden koloniler, sağ taraf laktoz fermente etmeyen koloniler.

Ayrıca gastrointestinal kanalda yaşayan, ancak Enterobacteriaceae'ye ait olmayan Aeromonas sp, Plesiomonas sp gibi diğer enterik basilleri izole etmek için de kullanılabilir.

Son olarak, çevrede, suda veya toprakta bulunan, ancak bazen Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia gibi fırsatçı patojenler olabilen, glikoz fermente etmeyen diğer Gram negatif basilleri izole edebilir.

temel

MacConkey agar

Bu ortamın temeli, bileşenlerinin açıklamasıyla açıklanabilir, çünkü her birinin bir özelliğini belirleyen bir amacı vardır.

Safra tuzları ve kristal menekşe

Bu anlamda MacConkey agar karmaşık bir bileşime sahiptir. Öncelikle safra tuzları ve kristal menekşe içerir.

Bu elementler, Gram pozitif bakterilerin ve bazı güç üreyen Gram negatif basillerin büyümesini engellemekten sorumludur. Buna karşılık, bu maddelerden etkilenmeyen Gram negatif basillerin gelişmesine yardımcı olur. Bu nedenle seçici bir ortamdır.

Gram pozitif bakterilerin ve ayrıca çoğu Gram negatif bakterinin büyümesini de inhibe eden diğer besiyerine kıyasla biraz seçici olduğu söylenir.

Peptonlar, polipektonlar ve laktoz

Peptonlar, polipektonlar ve laktoz gibi bu ortamda gelişen mikroorganizmalara gerekli besinleri sağlayan maddeleri içerir.

Laktoz, laktozu fermente etme kabiliyetine sahip mikroorganizmalar güçlü pembe koloniler geliştireceğinden, besiyerinin farklı bir ortam olmasının kilit noktasıdır.

Bazı bakteriler, laktozu yavaş veya zayıf fermente edebilir, soluk pembe koloniler geliştirebilir ve laktoz pozitif kalabilir.

Laktozu fermente etmeyenler, besiyerini alkalize ederek amonyak üreterek enerji kaynağı olarak pepton kullanırlar. Bu nedenle ortaya çıkan koloniler renksiz veya şeffaftır.

PH göstergesi

Renk değişimi, MacConkey agar'ın sahip olduğu başka bir temel bileşik aracılığıyla sağlanır. Bu bileşik, bu durumda nötr kırmızı olan pH göstergesidir.

Laktoz fermantasyonu, karışık asitlerin üretimini oluşturur. Ortamı 6.8'in altında bir pH'a asitlendirirler.

Bu, pH göstergesinin koyu pembe bir tona dönmesine neden olur. Rengin yoğunluğu, nihai pH'a bağlı olarak değişebilir.

Damıtılmış su, sodyum klorür ve agar

Öte yandan besiyerine hidrasyon ve ozmotik denge sağlayan distile su ve sodyum klorür içerir. Son olarak, besiyeri, katı ortamın kıvamını sağlayan baz olan agar içerir.

Hazırlanan MacConkey agar besiyerinin nihai pH'ı 7,1 ± 0,2'ye ayarlanmış olmalıdır.

Hazırlık

Bir litre MacConkey agar için, 50 g susuz ortam tartılmalı, ardından bir şişeye konulmalı ve bir litre damıtılmış su içinde çözülmelidir. 10 dakika bekletildikten sonra ısıtılır, 1 dakika kaynayana kadar sürekli karıştırılır.

Şişe daha sonra otoklava yerleştirilir ve 121 ° C'de 20 dakika sterilize edilir. Sürenin sonunda, otoklavdan çıkarılır ve 45 ° C'lik bir sıcaklığa ulaşana kadar soğumaya bırakılır, daha sonra bir laminer akış başlığı içinde veya Bunsen brülörünün önünde steril Petri kaplarında servis edilir.

Sertleşmesine ve ters çevrilmiş bir plaka tutucuda saklanmasına izin verin ve kullanıma kadar 2-8 ° C'de buzdolabında buzdolabında saklayın.

Proteus cinsi tarafından üretilen swarning etkisini inhibe eden bir MacConkey agar elde etmek için düşük tuzlu bir MacConkey agar kullanılır.

Geleneksel MacConkey agar kullanımı

MacConkey Agar, laboratuvarda alınan klinik örneklerin ekilmesi için düzenlenen tüm kültür besiyeri setlerine dahildir. Aynı zamanda gıda mikrobiyolojisi ve çevresel mikrobiyolojide de faydalıdır.

Bu besiyerinde yetişen Gram negatif çubukların çeşitliliği, söz konusu türler için varsayımsal bir tanı koymaya yardımcı olan fenotipik özellikleri ifade eder. Örneğin kolonilerin boyutu, rengi, kıvamı ve kokusu yol gösterebilecek özelliklerden bazılarıdır.

Bu besiyerinde, Escherichia coli, Klebsiella sp ve Enterobacter sp türleri, bir çökelmiş safra bölgesi ile çevrili güçlü pembe koloniler oluşturur.

Oysa Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ve Hafnia sp gibi bakteriler 24 saat sonra renksiz veya 24-48 saat sonra soluk pembe görünebilir.

Aynı şekilde Proteus, Edwadsiella, Salmonella ve Shigella cinsleri de renksiz veya şeffaf koloniler üretir.

MacConkey agar'ın diğer çeşitleri

MacConkey Agar'ın belirli amaçları olan başka varyantları da vardır. Aşağıda bunlardan bahsedilmektedir:

Sorbitol içeren MacConkey agar

Bu besiyeri, enteropatojenik suşu (enterohemorajik Escherichia coli O157: H7) diğer Escherichia coli suşlarından ayırmak için tasarlanmıştır.

Bu besiyeri, karbonhidrat laktozu sorbitol ile değiştirir. Enterohemorajik E. coli suşları O157: H7, sorbitolü fermente etmedikleri ve bu nedenle şeffaf koloniler elde edildiği için diğerlerinden farklıdır, buna karşılık E. coli suşlarının geri kalanı sorbitolü fermente eder ve koloniler güçlü pembedir.

Kristal viyole ve tuz içermeyen MacConkey agar

Bu agar, menekşe kristali olmadığı ve Gram pozitif bakteriler büyüyebileceği için klasik MacConkey agardan büyük ölçüde farklıdır.

Öte yandan, tuzun yokluğu, Proteus cinsindekiler gibi bazı enterik basiller tarafından üretilen agar üzerinde kümelenme oluşumunu engeller ve böylece Gram pozitif bakteriler dahil mevcut tüm bakterilerin izolasyonunu kolaylaştırır.

Sefoperazon içeren MacConkey agar

Bu MacConkey Agar varyantı, başlangıçta Laribacter hongkongensis'i izole etmek için tasarlanmıştır ve daha sonra Arcobacter butzleri izolasyonu için yararlı olduğu bulunmuştur. Her ikisi de sefoperazona dirençli hafif kavisli Gram negatif çubuklardır.

Bu bakteriler, son zamanlarda Asya ve Avrupalı ​​bireylerde gastroenterite ve edinilmiş ishale neden olmak üzere ilişkilendirilmiş ve ortaya çıkan iki güçlü patojen olarak ortaya çıkmıştır.

Antibiyotik, bu bakterilerin gelişimini kolaylaştıran eşlik eden gastrointestinal sistem florasını engellemeye izin verir ve büyümeleri için 72 saate ihtiyaç duydukları için fark edilmemelerini önler.

% 10 h / h deniz suyu ile hazırlanan MacConkey agar

Bu varyant, rekreasyonel tuzlu sularda (plajlar ve koylar) toplam koliformlar ve dışkı koliformları dahil olmak üzere dışkı kirliliğinin bakteriyel sıhhi göstergelerinin değerlendirilmesi için kullanışlıdır.

2013 yılında Cortez ve arkadaşları, bu şekilde hazırlanan besiyerinin, damıtılmış suyla hazırlanan MacConkey agar kullanımına kıyasla tuzlu ortamda bu mikroorganizmaların geri kazanımını önemli ölçüde artırdığını göstermiştir.

Bunun nedeni, değiştirilmiş ortamın fizyolojik olarak "canlı ancak kültürlenemeyen" bir gecikme durumunda olan bakterilerin büyümesini uyardığı, bu nedenle bunlar geleneksel ortamda geri kazanılamayacakları gerçeğidir.

Referanslar

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, ve diğerleri. Laribacter hongkongensis'in seçici izolasyonu için cefoperazone MacConkey agar kullanımı. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. MacConkey agar. Vikipedi, bedava ansiklopedi. 4 Nisan 2018, 18:16 UTC. 29 Ara 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Arjantin. Editoryal Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik Tanı. (5. baskı). Arjantin, Editoryal Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Venezuela, Falcón eyaleti Chichiriviche'deki kaplıcaların deniz sularında deniz suyu ile hazırlanan kültür ortamlarının sağlık göstergelerine etkisi. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. Garcia P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Pratik klinik mikrobiyoloji. Cadiz Üniversitesi, 2. baskı. UCA Yayınları Hizmeti.