Ağar, Salmonella, Shigella , aynı zamanda, SS agar olarak bilinen orta, özellikle klinik olarak cins, Salmonella ve Shigella, hem çevre örnekleri arasında, enteropatojenik bakterilerin izolasyonu için tasarlanmış bir seçici ve diferansiyel besiyeridir.
SS agar karmaşık bir bileşime sahiptir; Et ekstraktı, pepton, laktoz, safra tuzları, sodyum sitrat, sodyum tiyosülfat, ferrik sitrat, agar, nötr kırmızı, parlak yeşil ve damıtılmış sudan oluşur. Büyük seçiciliği göz önüne alındığında, bol karışık floraya sahip örnekler ekilebilir.
Salmonella sp kolonileri içeren SS agar. Kaynak: Manurx27, Wikimedia Commons'tan
Mikrobiyoloji laboratuvarlarında Salmonella-Shigella besiyeri, ishalli dışkı örneklerinde, kanalizasyonda, içme suyunda ve yiyeceklerde Salmonella ve Shigella varlığını araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır.
Bazen, Salmonella suşlarını geri kazanmak için ön zenginleştirme broth'ları (laktoz çorbası) ve zenginleştirme broth'u (selenit sistin çorbası) kullanmak gerekir.
Bu adımlar, çok düşük miktarda Salmonella'nın varlığından şüphelenildiğinde veya suşun, esas olarak işlenmiş gıdalar olmak üzere endüstriyel üretime özgü süreçler tarafından kötüye kullanılabileceği durumlarda gereklidir. Antibiyotiklerle tedavi edilmiş hastalardan alınan dışkı örneklerinin zenginleştirilmesi de tavsiye edilir.
Daha sonra, zenginleştirilmiş broth, Salmonella-Shigella agar ve ksiloz agar, lizin deoksikolat (XLD) ve enterik Hektoen agar (HE) gibi diğer benzer ortamlar üzerine ekilebilir.
temel
Salmonella-Shigella kültür besiyerinin her bir bileşeninin belirli bir işlevi vardır ve bir bütün olarak karışım, onu karakterize eden özellikleri sağlar.
Besleyici güç
Et ekstraktı ve pepton (kazein ve hayvan dokusuyla sindirilmiş), bileşenlerin geri kalanını tolere edebilen mikroorganizmaların gelişimi için gerekli besinleri (nitrojen, karbon ve vitaminler) sağlar.
Tutarlılık
Besiyerine katı kıvam sağlamaktan agar-agar sorumludur.
Seçici
Bu besiyeri, safra tuzları, sodyum sitrat ve parlak yeşil içerdiği için oldukça seçicidir. Bu nedenle, bazı koliformlar dahil olmak üzere tüm Gram pozitif bakterilerin ve çoğu Gram negatif basilinin büyümesini engeller.
Salmonella cinsi bakteriler ve bazı Shigella türleri bu bileşikleri destekler.
Esas olarak, Salmonella cinsi safra tuzlarına karşı çok dirençlidir, öyle ki dışkılarında sürekli olarak bakterileri döken bazı taşıyıcı hastaların safra kesesinde yaşayabilirler.
Diferansiyel
Laktoz, laktozu fermente eden suşları fermente olmayan türlerden ayırmaya yardımcı olan fermente edilebilir karbonhidrattır. Bu özellik, bu ortamda fenol kırmızısı olan pH indikatörünün varlığı ile kanıtlanır.
Laktoz fermente edici suşlar kırmızı koloniler verirken, fermente olmayan suşlar renksizdir. Salmonella ve Shigella laktozu fermente etmediği için bu özellik önemlidir.
Öte yandan, bu besiyeri bir sülfür kaynağı olarak sodyum tiyosülfat ve bir demir kaynağı olarak ferrik sitrat içerir. Her iki bileşik de hidrojen sülfit üretebilen bakterileri ayırt edebilir. Bunlar, görünür, çözünmez, siyah bir ferrik sülfür çökeltisi oluşturmak için reaksiyona girer.
Bu özellik, Salmonella cinsinin bazı türlerinde bulunur. Normalde kolonileri düz renksizdir ve ortasında siyah bir nokta vardır. Salmonella'nın geri kalanı H 2 S üretmez ve renksiz koloniler olarak gelişir.
Öte yandan, Shigella cinsinin kolonileri kararmadan düz renksizdir.
Hazırlık
Bu ortamın hazırlanması çok basittir.
63 g kurutulmuş ticari besiyerini tartın ve bir litre damıtılmış su içinde çözün. Çözeltiyi ısıtın ve karıştırın. Karışım dakikalara kadar kaynayabilir.
Bu besiyeri otoklavlanmamalıdır. Çözüldükten sonra doğrudan tek veya çift steril tabaklara servis edilir.
Katılaştıklarında, trombositler üzerinde ters bir şekilde dizilirler ve kullanıma kadar buzdolabında (2-8 ° C) saklanırlar.
Hazırlandıktan sonra besiyeri pH 7.2 ± 0.2'de ve turuncu-kırmızı renkte kalmalıdır.
Numuneleri tohumlamadan önce plakaların ısınmasına izin vermek önemlidir. Orijinal numune doğrudan ekilebilir, materyal agarın bir kısmına boşaltılır ve ardından buradan ekilebilir.
Zenginleştirilmiş et suyu kullanılması durumunda, selenit suyunun bir kısmını geçirin ve drigalski spatula ile ekin.
Aerobiosis içinde 37 ° C'de 24 saat inkübe edin.
Tartılacak gram sayısının ve ortamın nihai pH'ının bir ticari evden diğerine değişebileceğini unutmayın. Orta taban her zaman hazırlığı için göstergeler getirir.
kullanım
Sıklıkla dışkı kültürü analizinde ve atık su, içme suyu ve yiyecek örneklerinin mikrobiyolojik çalışmasında kullanılır.
Sıklıkla çift plaklar hazırlanır, bir tarafa Salmonella-Shigella agar, diğer tarafa XLD agar yerleştirilir.
Sınırlamalar
-Bazı Shigella suşları bu besiyerinde büyümez. Bu nedenle, bu cinsin birincil izolasyonu için tavsiye edilmez.
-Siyah merkezli her şeffaf koloni Salmonella belirtisi değildir; Bazı Proteus suşlarının kolonileri Salmonella kolonilerinden ayırt edilemediğinden doğru bir tanımlama yapmak için biyokimyasal testler yapılmalıdır.
- Susuz ortam, çok higroskopik olduğu için çevreye maruz kalmaya dikkat etmelidir. Bu nedenle kuru ve iyi kapatılmış bir ortamda muhafaza edilmelidir. Çok kısa süreler için açık.
- Zamanla ortamdaki safra tuzları çökelebilir ve agar içindeki bir mata benzer bir görüntü oluşturabilir, ancak bu sonuçları etkilemez.
-Bazı Shigella türleri laktozu yavaşça fermente edebilir.
QA
Besiyerinin doğru çalıştığını kanıtlamak için, bilinen veya sertifikalı kontrol suşlarının ekilmesi ve büyümenin beklenen özellikleri karşılayıp karşılamadığının gözlemlenmesi tavsiye edilir.
Bunun için E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium veya Enterococcus faecalis suşları kullanılabilir.
Beklenen sonuçlar:
Enterobacter ve Klebsiella ------ büyük koloniler ve kırmızı veya pembe mukoidler.
Shigella flexneri ---------- şeffaf veya renksiz düz koloniler.
Salmonella typhimurium ------ siyah merkezleri olan renksiz koloniler.
Enterococcus faecalis -------- toplam inhibisyon.
Referanslar
- Difco Francisco Soria Melguizo Laboratuvarları. Salmonella-Shigella agar. 2009. f-soria.es adresinden ulaşılabilir
- BD Laboratuvarı. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Şu adresten ulaşılabilir: bd.com
- Britannia Laboratuvarları. Salmonella-Shigella Agar. 2015. britanialab.com'da bulunabilir
- Valtek teşhisi. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2010. Andinamedica.com adresinde mevcuttur
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Arjantin.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiyolojik Tanı. 5. baskı. Editoryal Panamericana SA Arjantin.