TRIPTIKAZIN SOYA AGARI: MANTIK, HAZIRLIK VE KULLANIMLAR - BIYOLOJI - 2024

Tripton agar soya veya Trypticase Soy Agar katı bir kültür ortamı ve beslenme, seçici olmayan. İngilizce Trypticase Soy Agar'daki kısaltması için TSA harfleriyle belirtilmiştir. Triptein, soya peptonu, sodyum klorür ve agar-agardan oluşur.

Yüksek besin gücü sayesinde orta derecede zorlu ve talepkar olmayan mikroorganizmaların yetiştirilmesi için idealdir. Ek katkı maddeleri içermeyen ortam, birincil kültürler için tavsiye edilmez, ancak diğer kullanımların yanı sıra saf suşların alt kültürlenmesi ve canlı tutulması için çok yararlıdır.

Triptikazin soya agar dilimleri bakalit kapaklı tüplerde. Kaynak: Fotoğraf, yazar MSc tarafından çekilmiştir. Marielsa Gil.

Ayrıca bu agar, özellikle hemoliz modellerini gözlemlemek ve sırasıyla Streptococcus pneumoniae ve Streptococcus pyogenes tanısında gerekli olan optoquine ve bacitracin taksonlarını monte etmek gerektiğinde, kanlı agar gibi zenginleştirilmiş besiyerinin hazırlanması için bir temel görevi görür.

Öte yandan, antibiyotiklerle kombine edildiğinde, karışık floraya sahip örneklerden klinik olarak önemli fakültatif ve katı anaerobik mikroorganizmaları izole etmek faydalıdır.

Son olarak, triptikazin soya agarının bileşimi ve performansı, farklı farmakopeler (Avrupa, Japon ve Kuzey Amerika) tarafından belirlenen gereksinimleri karşılar.

temel

Bakterilerin düzgün gelişimi için amino asitler, vitaminler, purik ve pirimidik bazlar gibi enerji kaynaklarının varlığı gereklidir.

Bu anlamda triptein ve soya peptonu bu besin maddelerini mikroorganizmalara sağlayarak tam gelişimini sağlar. Bununla birlikte, güç üreyen bakteriler için, zenginleşmesini artırmak için bu agarı defibrine kan veya ısıtılmış kan ile desteklemek gerekir.

Öte yandan, ortama antibiyotikler eklenirse, seçici bir ortam haline gelir. Listeria cinsinin türlerinin izolasyonunu desteklemek için% 0,6 maya özütü eklenebilirken, sistin tellürit ve kuzu kanı ilavesi Corynebacterium diphteriae için idealdir.

Son olarak, sodyum klorür ortama ozmotik dengeyi sağlar ve agar katı kıvamı sağlar.

Hazırlık

Triptikazin Soya Agar Plakaları

Triptikazin soya agarını hazırlamak için, 40 g kurutulmuş ticari besiyeri dijital ölçekte tartılmalıdır. Bir şişede bulunan bir litre damıtılmış suda çözülür.

Karışım 5 dakika dinlenmeye bırakılır ve daha sonra ortamın çözünmesine yardımcı olmak için bir ısı kaynağına alınır. Sık sık karıştırılmalı ve 1-2 dakika kaynatılmalıdır. Daha sonra ortam otoklavda 121 ° C'de 15 dakika sterilize edilir.

50 ° C'ye soğumaya bırakın ve steril Petri kaplarına dağıtın. Katılaşmaya, ters çevirmeye, plaquerolar halinde sipariş vermeye ve buzdolabında saklamaya izin verin.

Ortamın nihai pH'ı 7,3 ​​± 0,2 olmalıdır.

Susuz kültür ortamının renginin açık bej olduğu ve kuru bir yerde 10 ila 35 ° C arasında saklanması gerektiği unutulmamalıdır.

Hazırlanan agar, açık kehribar rengindedir. Hazırlanan tabaklar kullanıma kadar buzdolabında (2-8 ° C) saklanmalıdır.

Kullanmadan önce plakalar oda sıcaklığına ulaşmalıdır.

Triptikazin soya agar plakaları kanla desteklenmiştir

Triptikazin soya agarı 50 ° C'ye soğutulurken kanlı agar% 5 defibrine kan eklenerek hazırlanır. Nazik hareketlerle döndürülerek karışım homojenleştirilir.

Steril Petri kaplarında servis yapın. Orta renk kiraz kırmızısı olmalıdır.

Triptikazin soya agar plakaları ısıtılmış kanla desteklenmiştir

TSA bazlı kanlı agar hazırlamak için, daha önce açıklanan prosedürlerle aynı şekilde ilerleyin, ancak otoklavdan çıkarken, besiyerinin sıcaklığı yaklaşık 56 ila 70 ° C arasında olana kadar dinlenmeye bırakılır. Bu sırada kan yerleştirilir ve ortam kahverengiye dönene kadar karıştırılır.

Steril Petri kaplarında servis yapın. Besiyerinin rengi çikolata kahverengidir.

Triptikazin Soya Agar Dilimleri

Agar hazırlama prosedürü plakalar için tarif edilenle aynıdır, farkla birlikte besiyerini Petri kaplarına servis etmek yerine, sterilizasyondan önce Bakalit kapaklı tüplerde 10 ila 12 ml arasında dağıtılmasıdır.

Ardından tüpler 121 ° C'de 15 dakika otoklavlanır. Ayrıldıklarında, bir destek yardımı ile eğilirler ve katılaşmalarına izin verilir.

Hazırlanan takozlar yüzey alanına göre ekilir ve bazı zorlu olmayan mikroorganizmaları belirli bir süre canlı tutmaya yarar.

Uygulamalar

Trypticasein Soy Agar aşağıdaki durumlarda kullanılır:

-Çoğu laboratuvarda rutin olarak kullanılan klasik kanlı agar hazırlamak için temel olarak.

- Zorlu bakterilerin izolasyonu.

- Hemoliz paterninin gözlemlenmesi.

- Teşhis testlerinin yürütülmesi.

-Korynebacterium diphteriae için sistin tellürit ve kuzu kanı ile özel kanlı agar hazırlamak için temel olarak.

-Kuzu kanlı agar, artı anaerobların özellikle Bacteroides sp. Büyümesi için kanamisin-vankomisin hazırlamak için bir temel olarak

- Zorunlu olmayan türlerin (Bacterioteca) bakımı için.

- Su, çevre, gıda ve kozmetik numunelerin mikrobiyal sınırı çalışmasında aerobik mikrobiyal sayım.

ekilen

Örnekler, kan veya diğer katkı maddeleriyle desteklenmiş Trypticasein Soy Agar yüzeyine doğrudan ekilebilir. Bitkinlikle ekilir.

Oysa, katkı maddesi içermeyen triptikazin soya agar plakaları genellikle mikrobiyal suşların (bakteri veya maya) alt kültürlenmesi için kullanılır.

QA

Sterilite kontrolü

Trypticasein Soy Agar ile hazırlanan farklı besiyerinin sterilliğini kontrol etmek için aşağıdakilerin yapılması önerilir: hazırlanan her partiden 1 veya 2 inoküle edilmemiş plak veya tüp, sterilliklerini kanıtlamak için 37 ° C'de 24 saat inkübe edilmelidir. Her durumda büyümeden kalmalıdır.

Kontaminasyon bulunursa, partinin tamamı atılmalıdır.

Büyüme kontrolü

Triptikazin soya agarının düzgün işleyişini incelemek için aşağıdaki bakteri suşları kullanılabilir: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 ve Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Suşlar tohumlanır ve aerobik olarak 37 ° C'de 24 saat inkübe edilir.

Her durumda büyüme tatmin edici olmalıdır.

Candida albicans Complex ATCC 10231 ve Aspergillus niger ATCC 16404 gibi mantarlar da kullanılabilir, her iki suş için de iyi büyüme beklenir.

Kan takviyeli triptikazin soya agarının büyüme kontrolü ve hemoliz modeli

Bu bazla hazırlanan kanlı agarın düzgün çalıştığını doğrulamak için aşağıdaki suşlar kullanılabilir: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 ve Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Tohumlanırlar ve 24 saat boyunca mikroaerofilisitede 37 ° C'de inkübe edilirler.

S. pyogenes'te beta hemoliz (koloni etrafında hafif halo) gözlemlenmesi ve her iki S. pneumoniae suşunda da alfa hemoliz (koloni çevresinde yeşilimsi halo) gözlenmesi gerektiği dikkate alınarak, her durumda gelişim tatmin edici olmalıdır. koloni).

Referanslar

1. Wikipedia'ya katkıda bulunanlar. Triptikaz Ben agarım. Vikipedi, bedava ansiklopedi. 17 Aralık 2018, 15:47 UTC. Mevcut: https://en.wikipedia.org
2. Britannia Laboratuvarları. Triptein soya agarı. 2015. britanialab.com'da bulunabilir
3. Neogen Laboratuvarları. Triptik soya agarı. Bulunduğu yer: foodafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Mikrobiyolojik Tanı. 12 ed. Arjantin. Editoryal Panamericana SA
5. BD Laboratuvarları. Triptikaz Ben Agar'ım. 2014. Şu adresten ulaşılabilir: .bd.com