VOGEL-JOHNSON AGAR: MANTIK, HAZIRLIK VE KULLANIMLAR - BIYOLOJI - 2025

Agar Vogel-Johnson , özellikle Staphylococcus aureus izolasyonu için formüle edilen bir katı ortam seçici ve diferansiyel kültürüdür. Bu besiyeri, 1960 yılında Vogel ve Johnson tarafından 1955'te Zebovitz, Evans ve Niven tarafından formüle edilen tellürit glisin agarının modifikasyonundan oluşturuldu.

Modifikasyon, ortamda bulunan mannitol konsantrasyonunun artırılması ve bir pH indikatörünün dahil edilmesinden oluşuyordu. Mevcut formül, triptein, maya özütü, mannitol, dipotasyum fosfat, lityum klorür, glisin, fenol kırmızısı, agar,% 1 potasyum tellürit çözeltisi ve sudan oluşur.

Kaynak: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. Flickr.

Tuzlu mannitol agar ve Baird Parker agar gibi, Vogel-Johnson agar gibi S. aureus izolasyonu için seçici olan başka besiyerlerinin de olduğu unutulmamalıdır. Bu anlamda Vogel-Johnson agarın temelinin tuzlu mannitol agar ve Baird Parker agar karışımı olduğu söylenebilir.

İlkinde, S. aureus kolonileri mannitol fermente edilerek ve pH indikatörü sarıya döndürülerek ayırt edilir. Öte yandan, ikinci olarak, S. aureus, tellüriti tellüruma indirgemek ve gri ila siyah koloniler oluşturmakla karakterizedir. Her iki özellik de Vogel-Johnson agarda gözlemlenir.

Bu besiyeri, benzerleri gibi, gıda numunelerinde, endüstriyel ürünlerin sıhhi kontrollerinde ve klinik numunelerde Staphylococcus aureus'un saptanması için yararlıdır.

temel

Besin kaynağı

Vogel-Johnson besiyeri, triptein ve maya özütü içerir; Her iki madde de bakteri büyümesi için gerekli karbon ve nitrojen kaynağı olarak hizmet eden uzun zincirli amino asitler sağlar. Bu besiyerinde üreyebilen bakteriler bu maddelerden besinleri alacaktır.

Seçici güç

Vogel-Johnson agar, Gram negatif bakterilerin ve hatta bazı Gram pozitif bakterilerin büyümesini inhibe ederek koagülaz pozitif stafilokokların gelişimini destekler. Engelleyici maddeler potasyum tellürit, lityum klorür ve glisindir.

Diferansiyel güç

Bu diferansiyel ortamı yapan maddeler mannitol ve potasyum tellürittir. Mannitol bir karbonhidrattır ve fermente edildiğinde, kırmızı fenol pH indikatörünün varlığı sayesinde besiyerini kırmızıdan sarıya çeviren asitler üretilir.

Serbest metalik tellüre indirgendiğinde renksiz tellürit koyu griden siyaha renk alır.

Staphylococcus aureus, mannitolü fermente eder ve tellüriti tellüruma indirger. Bu nedenle, bu besiyerindeki tipik S. aureus kolonileri gri veya siyahtır ve sarı bir ortamla çevrilidir.

Bu besiyerinde büyüyen ve tellüriti veya ferment mannitolü indirgemeyen bakteriler, peptonların kullanılmasıyla besiyerinin alkalizasyonu nedeniyle orijinal renkten daha yoğun, kırmızı renkli bir ortamla çevrili şeffaf koloniler oluşturacaktır.

Öte yandan tellüriti azaltan ancak mannitolü fermente etmeyen bakteriler, koyu kırmızı bir ortamla çevrili gri veya siyah koloniler halinde büyüyecektir.

Besiyeri potasyum tellürit eklenmeden hazırlandıysa, S. aureus kolonileri tuzlu mannitol agarda olduğu gibi sarı ortamla çevrili sarı koloniler olarak gelişecektir.

Ozmotik denge ve katılaştırıcı ajan

Dipotasyum fosfat ortamın ozmotik dengesini korur ve pH'ı nötr olacak şekilde ayarlar 7.2. Agar, kültür ortamına katı kıvamı verirken.

Hazırlık

Potasyum tellürit çözeltisi% 1 w / v

Otoklavda sterilize edilemediği için bu çözelti susuz ortama dahil değildir. Bu nedenle ayrı olarak hazırlanır ve önceden sterilize edilmiş ortama eklenir.

Bazı ticari evler, kullanıma hazır% 1 potasyum tellürit çözeltisini satmaktadır. Laboratuvarda hazırlık yapmak istiyorsanız, aşağıdaki işlemleri yapın:

1.0 g potasyum tellürit tartın ve 100 ml damıtılmış su ölçün. Potasyum tellüriti bir kısım su içinde çözdürün ve ardından su miktarını 100 ml'ye ulaşana kadar tamamlayın. Çözeltiyi filtrasyon yöntemi ile sterilize edin.

Vogel-Johnson Agar Baz Besiyeri

60 gr kurutulmuş ortamı tartın ve 1 litre distile suda çözün. Karışım tam çözünmeye yardımcı olmak için kaynatılır. Çözündürme işlemi sırasında ortam sık sık karıştırılır.

Otoklavda 15 pound basınçta ve 121 ° C'de 15 dakika sterilize edin. Otoklavdan çıkarın ve ortam yaklaşık 45 ila 50 ° C sıcaklığa ulaşıncaya kadar dinlenmesini bekleyin. Önceden hazırlanmış% 1 potasyum tellürit çözeltisinden 20 ml ekleyin.

Karıştırın ve steril Petri kaplarına dökün. Daha sonra kullanıma kadar buzdolabında saklamak için plaka tutucular üzerinde katılaşmaya ve ters çevrilmiş siparişe izin verin.

Hazırlanan ortamın nihai pH'ı 7.2 ± 0.2 olmalıdır.

Numune ekmeden önce, plakanın oda sıcaklığına ulaşmasını bekleyin.

Hazırlanan besiyerinin rengi kırmızıdır.

kullanım

S. aureus'un her türlü numunede izolasyonu için kullanılabilmesine rağmen, esas olarak farmasötik ürünler, kozmetikler ve gıdanın mikrobiyolojik analizi için kullanılmaktadır.

Aşının yoğun olması tavsiye edilir. Tohumlama, platin sapla veya Drigalski spatula ile yüzeye puanlanarak yapılabilir.

Plakalar, 35-37 ° C'de 24 ila 48 saat aerobiosis için inkübe edilir.

QA

Aşağıdaki kontrol suşları, Vogel-Johnson besiyerinde kalite kontrol gerçekleştirmek için kullanılabilir:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 veya Proteus mirabilis ATCC 43071.

Beklenen sonuç aşağıdaki gibidir: S. aureus suşları için, sarı ortam ile çevrili siyah kolonilerle tatmin edici büyüme. S. epidermidis için kırmızı ortamla çevrili yarı saydam veya siyah kolonilerle düzenli gelişim.

Benzer şekilde, E. coli için toplam inhibisyon ve Proteus mirabilis için kısmi veya toplam inhibisyon beklenir; büyürse, idareli olacak ve koloniler siyah, kırmızı bir renkle çevrelenecek.

Referanslar

1. BD Laboratuvarları. VJ (Vogel ve Johnson Agar). 2006. Şu adresten ulaşılabilir: bd.com
2. Britannia Laboratuvarları. Vogel-Johnson Agar. 2015. britanialab.com'da bulunabilir
3. Britannia Laboratuvarları. Potasyum tellürit. 2015. britania.com'da bulunabilir
4. Himedia Laboratuvarı. Vogel-Johnson Agar Ortamı. 2018. himedialabs.com/TD/MU023.pdf adresinde bulunabilir.
5. Vogel-Johnson Agar Tabanı. Merck Mikrobiyoloji Kılavuzu. 12. Baskı, s. 502-503. Mevcut: Kullanıcılar / Ekip / İndirmeler
6. Wikipédia'ya katkıda bulunanlar, "Ágar Vogel Jonhson", Wikipédia ücretsiz ansiklopedi, şu adresten ulaşılabilir: wikipedia.org.
7. Venezuela Standardı Covenin 1292-89. (1989). Gıdalar. Staphylococcus aureus'un izolasyonu ve sayımı. Sencamer.gob.ve adresinde mevcuttur